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维普资讯 吉林农业科学 2006，31(2)：62一封三 JournalofJilinAsriculturalSciences 文章绩号 ：1003—8701(2006)02-0062-04 链霉菌诱变育种方法综述 陈立梅 1,2，汪 旭 1，2，李启云 ’，杨石嶂 ’，杨信东2 (1．吉林省农业科学院，吉林 公主岭 136100；2．吉林农业大学农学院，长春 130118) 摘 要 ：主要论述了链霉菌的4种诱变方法 ，即物理诱变、化学诱变、空间技术诱变和复合诱变。同时对这 4种方法的原理及具体操作方法进行 了简要的阐述。其中物理诱变 中的紫外线诱变方法是一种使用时间长 、 效果好 、设备简单 、值得推广的诱变剂。化学诱变方法 中的EMS、8-Mop、NTG和LiCI也取得 了很好的效果。近 年来用宇宙系列生物卫星、科学返 回卫星、空间站及航天飞机等空间飞行器 ，进行搭载微生物材料的空间诱 变育种是培养新的生物菌种的一种有效方法。将 以上诱变方法结合起来使用，可取得更好 的诱变效果。 关键词 ：链霉菌 ；育种 ；诱变 中图文分类号 ：$482．2 文献标识码 iA 放线菌是产生抗生素活性最大的一类微生物，迄今已在工业、医学、农业上都有利用抗生素成功 的实例 ，而链霉菌又是放线菌中抗生素的主要产生菌 ，具有广泛的物种多样性和代谢多样性 ，是重要 的资源微生物 ，但在链霉菌中普遍存在遗传不稳定性 ，而引起抗生素产量下降。因此 ，各 国学者不断 研究提高抗生素产量的方法 ，已期获得更大产量的抗生素，而提高产量的最重要途径是通过育种改变 生产菌种。诱变育种是一种简便易行而且快速的选育方法 ，因而在抗生素的菌种筛选中应用最广泛。 本文就链霉菌诱变育种的几种方法做了简要论述。 1 物理 因子诱 变方法 1．1 紫外线诱变法 紫外线是一种使用时间长 、效果好、设备简单、值得推广的诱变剂 ，大约有 80％的高产抗生素产 生菌都 曾经用过紫外线这一诱变方法。具体操作方法是将斜面培养物制备成单孢子悬液或原生质体 放在磁力搅拌器上，开紫外灯(3ow，距 30cm)照射不同的时间后 ，涂平皿 (为防止回复突变 ，紫外线诱 变后的操作应在红灯下进行)进行培养 ，然后挑取不同形态的单菌落接斜面，进行摇瓶发酵筛选。用此 种方法 ，以土霉素产生菌龟裂链霉菌 Lf-2为出发菌株 ，经过紫外线诱变后 ，筛选的菌株于出发菌株相 比发酵效价提高了17．4％，发酵指数提高了23．9％。黄世文等对淡紫色吸水链霉菌进行紫外线诱变 ， 所获菌株发酵液对水稻纹枯病和恶苗病的抑杀效果比原始菌株明显提高 ，并且证实用菌悬液涂培养 基之后先在28~C培养 24h，再在紫外灯下诱变菌株比涂后直接照射和直接照射菌悬液所获得的诱变菌 株的生测效果好，这可能是微生物在培养 24}后，正处在分裂生长的初始阶段 ，当受到外部 “能量”作 用时较易发生变异。孟勇等以带棒链霉菌为出发菌 ，经紫外线诱变 ，筛选到 1株抗 20xl0-S~mL的舒 巴坦钠突变株 my51，my51菌株产克拉维酸的效价达到 834．7x10~g／mL，比出发菌株提高了1．18倍。张 雪松以金色链霉菌为出发菌株，经溶菌酶作用制备原生质体，然后以紫外线对原生质体进行诱变处 理 ，获得四环素高产菌株 ，第 20号菌株相对效价为 1．284。 收稿 日期 ：2005—12—31 基金项 目：本立项受到吉林省农业科学院生物技术中心项 目利“用生物技术研制新型、高效、多功能生物农药”(JLPT~~[] 科技部国家转基因植物研究与产业化专项 “转基因杂交大豆育种研究及产业化 ”(JY03一B—l6)的资助。 作者简介：陈立梅(19r79一)，女，硕士，研究方向：微生物农药。 维普资讯 2期 陈立梅等 ：链霉菌诱变育种方法综述 1．2 激光辐照诱变法 一 定量的激光照射生物体，其能量被生物大分子直接或间接吸收以后 ，可引起分子激发光解