ELISA抗体水平评价口蹄疫灭活疫苗免疫效果的可行性分析.pdfVIP

ELl SA抗体水平评价口蹄疫灭活疫苗免疫效果的可行性分析 施程洪，刘绍阳，朱明旺，王继华，代保坤，赵文祥，彭正放‘ (中牧实业股份有限公司保山生物药厂，云南保山678000；) 摘要：为了探讨免疫抗体评价口蹄疫灭活疫苗效果的可行性，5批次的口蹄疫0型、亚洲I型二价灭活疫苗(0S／99株 ELISA测定抗体效价，以分析抗体效价与免疫保护的关系。对获得数据统计学分析证明：二价灭活疫苗的0型免疫抗体值与攻 灭活疫苗免疫效果是完全可行的，评价疫猪0型灭活疫苗免疫效果不具有可行性。 关键词：灭活疫苗；抗体水平；百分率，o免疫效果 disease 口蹄疫(foot—and—mouthdisease，FMD)是由口蹄疫病毒(foot—and—mouthvirus，FMDV)感 染引起的，以感染和危害偶蹄动物为特征的一种热性、急性、高度接触性传染病¨1。该病以传播迅速、发 一类传染病第一位。目前，在我国，口蹄疫灭活疫苗仍然是通过本动物攻毒效力试验来检验其效果。该方 法其一不仅需要大量的未接种口蹄疫灭活疫苗动物(这与我国口蹄疫疫苗实行政府强制免疫，试验用健康 动物来源越来越困难存在矛盾)，增加疫苗的成本。其二，检验动物由于地域、品质、健康情况存在个体差 异，在一定情况下也导致了检验结果不能反映疫苗效力的的实际情况。此外，该方法在进行疫苗效力检验 时，需用到大量的感染性病毒，一旦安全设施出现故障，就会使活病毒逃逸到外界环境中，造成生物安全 事故。 株+0S／99株)为研究对象，旨在通过对口蹄疫灭活疫苗免疫抗体水平跟踪进行监测，并将免疫抗体与攻毒 保护百分率(概率单位)进行比较研究，分析二者是否存在显著的正相关平行关系，是否具备在今后口蹄 疫灭活疫苗效力检验中，应用免疫抗体来评价疫苗效果的可行性。 1材料与方法 1．1 试剂 0型口蹄疫抗体检测液相阻断ELISA试剂盒：兰州兽医研究所产品；亚洲一I型口蹄疫抗体检测液相阻 断ELISA试剂盒：兰州兽医研究所产品；牛羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒： 上海优耐特公司产品：猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒：上蓐纪耐劳公司产晶。 1．2试验动物 体检测为阴性)154头，购自云南省大理州云龙县。 1．2．2 测为阴性)154头，购自云南省保山市施甸县。 1．3疫苗 1．3．1 提供，批号为10001、10002、10003、10004、10005。 基金项目：中牧实业股份有限公司201C-年技改项目 作者简介：施程洪(1982年一)，男，汉族，云南建水人，工程师，硕士 通讯作者：彭正敲，从事动物疫苗的检验和研发工作．Tel：0875—2848588，E-mail：pengzhqi@163．COta 。——793—— 第四届中国兽药大会——兽医微生物学、兽医生物制品学学术论坛论文集(2012年) 11001、11002、11003、11004、11005。 1．4攻毒用强毒 1．4。l 株，LD50为10吨‘50／0．2ml，ID50为10。900／0．2ml。 1．4．2猪口蹄疫0型灭活疫苗(OZK／93株+0S／99株)攻毒用强毒： OZK／93师7强毒株，ID50为10屯5／2．Oml，LD。。为10q5／0．2ml。 0R／80虾8强毒株，I‰为10‘o／2．0ml，LOso为10。85／0．2ml。 1．5免疫效力检测 按照2010版《中国兽药典》推荐的P如试验检验疫苗的效力阳1 1．6免疫接种 1．6．1 头份3个免疫剂量组，每个剂量组分别于颈部肌肉注射10头牛，攻毒时均分为0型和亚洲I型组(各5头)， 另设0型和亚洲I型对照组各2头牛。 设OZK／93型和OR／80型对照组各2头猪。 1．7攻毒和结果判定 1．7．1 疫牛连同对照，舌上表面两侧分两点皮内分别注射牛口蹄疫病毒0型强毒和亚洲I型强毒，每点0．1ml(共 仅在舌面出现水泡或溃烂，而其它部位无病变时判为保护，除舌面以外任一部位出现典型口蹄疫病变(水 泡或溃烂)时判为不保护。 水泡或溃烂。免疫猪出现任何口蹄疫症状即判为不保护。 1．8血清抗体检测 免疫期满攻毒前对免疫牛和免疫猪进行采血分离血清，参照液相阻断ELISA试剂盒的方法检测0型和 亚洲I型免疫抗体 2 结果 2．1 口蹄