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f蛳 2006丰奎嗣博士生学术论《
1材料与方法
lI材料
zabulaeformis
供试材料为辽宁必城油松种了同油栏(Piuns carr)14号可育系及28号不育系。
采集雌配于体解除休眠处于几P个游离核时期的1}『=珠。细胞为r述胚珠离体培养诱导的悬浮细胞。
1 2方法
量元素中1；^n氢、磷或钙及蔗糖)+1+mg／LNAA+06mg／l。6-BA(附加06％琼脂)的培养基1-，在避度为
6h
25C±2C，光照强度1500Ix，光照时问Id的培养室中，培养4d，统计结果。
I 2 6-BA(附加
2悬浮细胞7L妊最的测定将悬浮培养的细胞0．Sg接种十MS+O5mg／LNAA+O
25mg／L
2．5％蔗糖)的新鲜培养液ih置于与胚蛛相吲的培养条件下，咀110“min的转速振荡培养，每天取样称
量鲜髓，并在80C条件下燃T细胞至恒垦，称丁蘑．取样车第7d，甲行实验3敬。
l 2．3悬浮细胞的处理将悬浮培养的两系细胞杠MS+0 25m∥L6-BA(附加25％蔗糖)
5mfLNAA+0
NAA+0
的培养液中培养2d后，转入MSf大量元素中只含镁)+0 6-BA的培养液中培养
5mejL 25mg／L
6．BA的
ld．然后转入MS或MS(人量，七j§巾分别不含氮、磷或钙及蔗糖)+05m—LNAA4025mg／L
培养液巾培养，每2h取样，统计结果。
1．24有丝分裂指数的测定l阪滴经过处理不刷育系悬浮培养细胞丁载片上，加一滴醋酸洋红染色液染
色，盖上盖玻片，在洒精灯t微烤后置于普通光学显微镜下观察细胞时相，每个样木训数1000个细胞，
分别计数分裂朝和非分裂期细胞，计算分裂指数。
有丝分裂指数=分裂期细胞数，全部细胞数X100％
1 2．5可溶性精的测定来用笨酚法【I，游离氨基酸的Ⅻ0定采用茚二酮法f”，可溶性蛋白质的测定采用考马
惭亮蓝G．25染色法”J。
2结果与分析
2 I两系胚珠在营养元素需求上的差别
可咀根据植株的外部形态来判断是否缺少营养幽1显不不同育性球果人小的差异卞蔓表现在珠鳞
上。不育乐珠鳞随着发育时期的进程比吖育系的增长更快，lⅢ胚珠则姓得小而小饱满。以胚珠的色泽为
擎。黪翻
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