溶菌酶测定方法之探讨.pdfVIP

[注3]STo为标准管加应用菌液反应5秒钟时的透光度。 [注4]ST2为标准管加应用菌液反应2分零5秒钟时的透光度。 [注5]100,ug／ml即2000U／ml即l／．∥ml；20U 用此方法测定溶菌酶本身存在如下问题： 1．在一个人操作的情况下，很难达到手眼一致的协调统_，造成读出的数据与记录不十分准确。 2．普通721型分光光度计与自动分光光度计相比，在短时间读取数据上，存在有一定的误差。 3．在测定过程中，几种试管不可能一起放入分光光度计中，在要求短时间内读取数据时，必然会造成系 统误差。 空白对照法 操作表 空白管 标准管 测定管 蒸馏水 O．2 0．1rng／na溶菌酶标准应用液(IIll) 0．2 样本(m1) 0．2 应用菌液(m1) 2．0 2．0 2．O 执行上述操作表后，把几支管逐个摇匀，37C准确水浴15分钟，立即取出置于012以下的冰水浴中3分 水浴15分钟后的透光度值)。 计算公式：溶菌酶含量=(测定管透光度巩，，一空白管透光度Crr。，)／(标准管透光度sr。，一空白管透光 度叽，)×标准管浓度×样本稀释倍数 溶菌酶含量(∥m1)、标准管浓度(100／∥ml即2000U／m1) 空白对照法与自身对照法相比有如下优点： 1．空白对照法与之相比在读取数据的时间掌握上，有一定的自由度，而且数据在短时间内变化不是太 大。 2．在操作方法上，空白对照法与自身对照法相比，手法不需要特别快速，只要求在15分钟后比色，所以 操作起来更加简便易行。 3．菌液、标准品、样本须先在0。12冰水浴中浴冷5分钟以上，最后读取的数据比较理想，相比之下准确度 更高。 18000u／rag的溶菌酶含鼍不同方法测定结果如下 样本 l# 2# 3# 4# 自身对照法 15000 19555 失败 15233 空白对照法 18000 18589 18000 18200 通过以上两种不同分析方法的对比试验，不难看出空白对照法相比自身对照法有其不可替代的优点， 它的可操作性比较强，检测的结果比较准确，通过日常工作的检测，发现空白对照法是非常可行的，是首选 的好方法。 122 溶菌酶测定方法之探讨 作者： 黎红， 黄俊英 作者单位： 天津蓝天集团股份有限公司 天津 300160 本文读者也读过(10条) 1. 惠妮.王艳.牛学良.孙伟.HUI Ni.WANG Yan.NIU Xue-liang.SUN Wei 金橙Ⅱ与溶菌酶相互作用的电化学研究[期 刊论文]-青岛农业大学学报（自然科学版）2008,25(2) 2. 于斐 7-羟基磷酰化黄酮和5，7-二羟基磷酰化黄酮与蛋白质的相互作用研究[学位论文]2004 3. 迟燕华.庄稼.张晓林.李克安 溶菌酶与邻-{2[α-(2-羟基-5-磺酸苯偶氮)-亚苄基]肼基}苯甲酸反应的分光光度 研究 [期刊论文]-分析测试学报2004,23(3) 4. 周林.段涛.董斌.李黄金 溶菌酶分离纯化综合性实验的开设[期刊论文]-医学教育探索2009,8(9) 5. 赵建民.宋林生.李成华.邹慧斌 海湾扇贝g型溶菌酶基因的重组表达及其产物活性分析[会议论文]-2005 6. 安米.马爱民.王晓宁.张华 应用不同方法检测重组人溶菌酶活性[期刊论文]-中国生物制品学杂志2004,17(3) 7. 谢三群.丛丽娜.张欢.王丹.Xie Sanqun.Cong Lina.Zhang Huan.Wang Dan 太平洋牡蛎i型溶菌酶基因的克隆与 重组高效表达[期刊论文]-生物技术通报2011(4