黄芪多糖对遗传性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响.pdfVIP

维普资讯 ■■珥字 杂志，2007，17(1)：12—14 @ 2007 CHINESEJOURNALOFMICROCIRCULATION 黄芪多糖对遗传性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响* 邹 丰 欧阳静萍 毛先睛 [中圈分类号] R587．1 [文献标识码] A [文章编号] 1005—1740(2007)01—0012—03 是葡萄糖的主要贮存形式 ，对糖代谢调节 tainedProteinLadder购 自美 国LifeScience公司； 血糖稳定起重要作用。糖原合成减少 、肝 Phospho—GlycogenSynthaseSer641Antibody购 自 原含量下降在 2型糖尿病的发生发展过程 美国CellSignalingTechnology公司；蛋 白内参采 中起着重要作用 引。本研究观察黄芪多糖 (As— 用 MonoclonalMouseAnti—Glyceraldehyde-3-Phos— tragalusPolysaccharide，APS)对遗 传性 糖 尿 病 phateDehydrogease(GAPDH)，购 自美国ABCAM (KKAy)tb鼠肝脏糖原含量的影响 ，探讨 APS的治 公 司；ProteinDetectorWesternBlotKitLumiglo 疗作用及其机制，为其临床应用提供实验和理论依 System购 自美 国KPL公司；OneTouch血糖测定 据 。 仪及试纸购 自美国强生公司。 1．3 实验观察指标和方法 1 材料与方法 1．3．1 一般情况观察 ：包括精神 、毛发、活动 、饮食 、 1．1 实验动物与分组 体重等。 雌性健康对照 C57BL／6J小 鼠和 KKAy小 鼠 1．3．2 血糖 、空腹血胰岛素 (Fins)及胰岛素抵抗指 (8周龄 ，SPF级)，购 自中国医学科学院，喂养于武 数 ：取尾静脉血 ，用 OneTouch定期监测血糖 ；实验 汉大学 ABSL一Ⅲ动物 中心。KKAy小 鼠饲高脂饲 动物禁食 12h后 ，腹腔注射氯胺酮 (150mg／kg)及 料 (58 脂肪 25．6 碳水化合物 ，16．4 蛋 白质)， 乙酰普吗嗪 (5mg／kg)麻醉后经眶周静脉取血 ，肝 C57BL,／6J小 鼠饲普通饲料 (12 脂肪 ，60 碳水化 素抗凝管收集血液，免疫法测定 Fins水平 ；胰岛素 合物 ，28 蛋 白质)。于 12周末测随机血糖 ，将血糖 抵抗指数用 HomaIR [3表示 。 浓度13．9mmol／L的KKAy小鼠随机分为：糖尿 1．3．3 肝脏糖原染色 ：标本置于4 中性福尔马林 病 (DM，一8)组 ，APS治疗 (DA，=8)组 ；将 固定 24~48h后做肝糖原染色 (高碘酸无色品红三 C57BL／6J小鼠随机分为空 白对 照 (C， 一10)组 ， 色法)。肝脏糖原染色在胞浆中呈紫红色颗粒 。 APS对照 (CA，一10)组 。两 APS组均采用 APS 1．3．4 肝脏糖原含量测定 ：取新鲜肝组织立即置于 溶液灌胃(700mg／kg／天)，空白对照组予以等量生 PBS中洗净血液 ，用滤纸充分干燥后称重 ，按照肝 理盐水灌 胃，均持续 8周。 糖原测定试剂盒的要求进行操作。 1．2 试剂与仪器 1．3．5 肝脏磷酸化糖原合成酶 (pser641GS)的测 优化水煎工艺从膜荚黄芪 (上海药材公司)中提 定 ：采用 Westernblotting方法 ：取一80℃冻存 的各 取 APS(湖北