凋亡素诱导HepG2细胞凋亡过程中Mcl-1+mRNA和蛋白水平的变化及意义.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(12)：2353—2356 · 2353 · [文章编号] 1000—4718(2009)12—2353—04 凋亡素诱导HepG2细胞凋亡过程中Mcl一1mRNA 和蛋 白水平的变化及意义术 朱惠明 ， 李银鹏 ， 侯晓华 ， 王 娜 (暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院消化内科，广东 深圳 518020； 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科，湖北 武汉430022) [摘 要] 目的：探讨凋亡素诱导肝癌细胞 HepG2凋亡过程 中Mcl一1mRNA和蛋白水平的变化及其意义。 方法：经脂质体介导将pCDNA3．0一VP3转入HepG2细胞内，48h后采用Westernblotting检测凋亡素、Mcl一1和细 胞色素c，实时定量RT—PCR检测细胞内的Mcl一1mRNA。结果：VP3基因成功地转入HepG2细胞内并稳定表达 凋亡素。与空白对照相比，表达凋亡素的细胞出现 Mcl—lmRNA含量减少 (0．09％±0．00％vs0．41％ ±0．14％， P0．05)，细胞内Mcl一1水平下降(0．43％±0．叭％ys0．90％±0．04％，P0．01)，线粒体释放细胞色素 c增加 (0．98％±0．02％ z0．62％±0．03％，P0．01)。结论：凋亡素诱导 HepG2细胞凋亡过程中存在细胞内Mel一1 mRNA和蛋白水平的下降，以及线粒体细胞色素 C的释放增加。凋亡素诱导的细胞凋亡可能与其下调细胞 内 Mcl一1mRNA与蛋白水平有关。 [关键词] HepG2细胞；Myeloidcellleukemin一1；凋亡素 ；细胞凋亡 [中图分类号】 R34 [文献标识码] A VariationandsignificanceofM cl—-1mRNA andproteinconcentrationin theapoptosisofHepG2cellsinducedbyapoptin ZHU Hui—uring ，LIYin—peng ，HOU Xiao—hua ，WANG Na (DepartmentofGastroenterology，ShenzhenPeople’sHospital，TheSecondClinicMedicalCollegeofJinanUniversity， Shenzhen518020，China；DepartmentofGastroenterology，UnionHospitalofTongiiMedicalCollege，HuazhongUniversity ofScienceandTechnology，Wuhan430022，China．E—mail：zhuhm@medmail．corn．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatethevariationandsignificanceofmRNAandproteinconcentrationofmyeloid cellleukemin一1(Mcl一1)inapoptoticHepG2cellsinducedbyapoptin．METHODS：Theapoptinexpressionvector pCDNA3．0一VP3wastransfeetedintoHepG2cellsvialiposome．Mcl一1mRNA wasanalyzedbyrea]一timequantitative reversetranscriptase—polymerasechainreaction．Theprotein ofapoptin，Mcl一1and cytochromeC weredetected by Westernblotting．RESULTS：TheVP3genewastransfeetedintoHepG2 cellssuccessfullyandexpressedsteadily．Com— paredtoblankcontrol，Mcl一-1mRNAandproteinlevelsofVP3positivec