小鼠骨髓来源内皮祖细胞体外诱导培养及分化特征.pdfVIP

理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(6)：1121—1126 [文章编号] 1000—4718(2011)06—1121—06 小 鼠骨髓来源内皮祖细胞体外诱导培养及分化特征 武 钧 ， 李建芳 ， 瞿 颖 ， 陈雪华 ， 汤耀卿 (上海交通大学医学院附属瑞金医院SICU，上海市消化外科研究所，上海 200025) [摘 要] 目的：研究小鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)的体外培养方法及体外分化特征。方法：采用梯度 离心法分离小鼠骨髓单个核细胞并进行诱导培养 ，用流式细胞术和免疫细胞化学对细胞表型特征进行检测 ，分别 采用MTI和Transwell方法对其增殖 、迁移能力进行检测。结果：体外培养4d至 14d，CD133、SCA一1及CD117的 表达率分别从 11．05％、29．32％及 l6．45％降至2．29％、7．82％及3．92％；而VEGFR一2、CD31、VE—cadherin、eNOS 及vWF的表达率分别从 12．21％、8．43％、18．27％、7．11％及 32．61％增加至62．13％、32．96％、67．73％、27．89％及 82．16％；吞噬acLDL和结合UEA—I的细胞从57．18％增加至86．70％。在0xIg／L至8o g／LVEGF浓度梯度下，细 胞增殖率和迁移率分别增加58．03％和33．83％。结论：EGM一2内皮培养基可稳定培养小鼠骨髓来源EPCs，培养过 程中其干细胞标志物表达逐渐降低，而内皮细胞标志物表达及特性不断增加，VEGF可显著促进其增殖和迁移。 [关键词] 内皮祖细胞；体外培养 ；分化特征 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．06．014 Characterizati0nanddifferentiationofmousebonemarrow —deriveden． dothelialprogenitorcells WUJun，LIJian—fang，QUYing，CHENXue—hua，TANGYao—qing (SurgicalIntensiveCareUnit，RujiinHospital，ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine，ShanghaiInstituteofDi— gestiveSurgery，Shanghai200025，China．E—mail：yaoqt@medmail．con．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheculturemethodanddifferentiationcharacteristicsofendothelialprogenitor cells(EPCs)derivedfrommousebonemarrow．METHODS：BonemanowmononuclearcellswereisolatedfromBALB／c micebydensitygradientcentrifugationandculturedinfibronectin—coateddisheswithEGM 一2medium．Thephenotypic characteristicsweredeterminedby andfluorescence—activatedcellso~er．Theproliferationandmirga- tioncapacitiesweredetected byMTrandTranswellassays，respectively．RESULTS：Whilethecellswere culturedin vitro，theexpressionofCD133，SCA 一1andCD117between day4 nadday14decreasedrfom 11．05％ ，29．32％ na d 16．45％ to2．29％ ，7．82％ and3．92％ ，respectively ．Nevertheless，VEGFR 一2，CD31，VE —eadherin，eNOSand