重组人血管内皮抑素对人多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖和相关蛋白表达的影响.pdfVIP

· 826 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(5)：826432 [文章编号] 1000-4718(2013)05．0826-07 重组人血管内皮抑素对人多发性骨髓瘤细胞 RPMI8226增殖和相关蛋 白表达的影响木 夏 盈 ， 郑 冬 ， 张珑涓 ， 李 娟 ， 郭小娟 (中山大学附属第一医院 血液内科 ，外科实验室，广东 广州510080) [摘 要] 目的：研究重组人血管内皮抑素(恩度)在体外对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞增殖、细 胞周期及细胞相关蛋白表达的影响。方法：用CCK-8检测恩度对RPMI8226细胞增殖的影响；流式细胞术检测凋 亡和细胞周期的改变；Westernblotting检测凋亡相关蛋白Bc1-2和caspase-3表达变化；以实时定量PCR和Western blotting检测 RPMI8226细胞血管细胞粘附因子 1(VCAM一1)、白细胞介素 6(IL-6)和血管内皮生长因子 (VEGF) mRNA以及蛋白表达变化 ；ELISA检测细胞上清液中细胞因子 IL-6和VEGF水平。结果：恩度对RPMI8226细胞 有增殖抑制作用，250mg／L恩度对RPMI8226细胞 72h增殖抑制率为(59．54-5．6)％(P0．05)，细胞G 期比例 增加 (P0．05)，但对细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3表达无显著影响；经恩度作用后 RPMI8226细胞 VCAM一1表达下降(P0．05)，IL-6和VEGF表达及分泌降低(均P0．05)。结论：恩度能通过改变细胞周期变化 抑制 RPMI8226细胞增殖，并能减少VCAM．1表达及 IL-6、VEGF分泌，对细胞凋亡无明显改变。 [关键词] 白细胞介素6；重组人血管内皮抑素；多发性骨髓瘤 ；血管内皮生长因子；血管细胞粘附因子 1 [中图分类号] R557．4 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．05．010 Recombinanthuman endostatin regulatesproliferation and relatedpro- teinexpression inhumanmultiplemyelomacelllineRPM I8226 XIAYing，ZHENGDong，ZHANGLong-juan，LIJuan，GUOXiao-juan (DepartmentofHemotology,2LaboratoryofSurgery，TheFirstAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou 510080，China．E-mail：zcxzd@tom．corn) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheeffectsofrecombinanthumanendostatin(Endostar)onproliferation，cell cycleconstitutionandregulationofrelatedproteinexpressioninRPMI8226cells．METHODS：CCK-8assaywasusedto exploretheeffectofEndostarontheproliferationofRPMI8226cells．TheactionofEndostaronapoptosisandcellcycle distributionweredeterminedbyflowcytometry．TheexpressionofBc1-2andcaspase-3wasevaluatedbyWesternblottinga- nalysis．Theproductionofvascularcelladhesionmolecule1(VCAM一1)，interleukin6(IL-6)andvascularendothelial growthfactor(VEGF)inresponsetoEndostarw