肾华片对慢性thy-1肾炎大鼠系膜细胞增殖抑制作用.pdfVIP

全国中西医结合发展战略研讨会 第四部分书面交流 价值有待于进一步研究。 PU-398 肾华片对慢性thy·1肾炎大鼠系膜细胞增殖的抑制作用 耿文佳魏日胞谢院生吕杨陈香美 解放军总医院肾脏病科全军肾脏病研究所肾脏疾病国家重点实验室 100853 【摘要】目的： 建立慢性thy-1系膜增生性肾炎大鼠模型，观察中药肾华片是否具有抑制 系膜细胞持续增殖的作用，并观察与细胞增殖密切相关的经典ERK／MAPK信号传导通路的 变化，探讨可能的分子机制，为寻找抑制系膜细胞增殖的新药提供参考。方法：1 OX7杂 交瘤细胞株小鼠腹腔内繁殖，腹水经ProteinA亲和层析法纯化获得Thyl单克隆抗体，通 过大鼠单侧肾切除、4次重复尾静脉注射抗thy-1抗体 2．5mg／kg ，制备慢性Thyl肾炎大 鼠模型。2 第4次抗体注射后第3周行干预治疗3月。每组8只，共7组：空白对照组 con 、 高剂量 SHH 、厄贝沙坦联合肾华中剂量组 Irb+SHM 。3 每2周留取血、尿标本，检测 肾功能、生化、尿蛋白定量。干预3月，观察肾脏病理学改变；免疫组化法检测系膜PCNA 阳性细胞数；WesternBlot检测肾皮质组织中细胞周期调节蛋白 cyclinD1、CDK4、p21 及ERK／MAPK通路中p-ERK的表达变化。结果：1 药物干预前thy-1组尿蛋白定量较 con组显著增多 P 0．05 ，thy-1组肾脏病理呈慢性系膜增生性改变，提示模型成功。2 干预3月后，①尿蛋白定量：与thy-1组比较，各干预组尿蛋白定量均显著降低，SHM具 有更显著降尿蛋白趋势，Irb+SHM联合用药组与I巾组及SHM组相比，尿蛋白定量无显著 油三酯水平显著降低。3 每个肾小球增殖细胞核抗原PCNA阳性细胞数，与con组比较， 更为明显。Westem D1、P-ERK蛋白 Blot结果显示，与con组相比，thy-1组大鼠cyclin D1、P-ERK蛋白表达明 表达增强了约2倍左右，p21蛋白表达明显降低；各治疗组cyclin 全国中西医结合发展战略研讨会 第四部分书面交流 显低于模型组，p21蛋白表达明显高于模型组。结论：本研究提示肾华片通过降低ERK活 化程度，使ERK／MAPK通路下游细胞周期蛋白cyclinD1表达降低，p21表达升高，PCNA 阳性系膜细胞数显著减少，治疗慢性thy-1肾炎有效。该结果为慢性系膜增殖性肾炎的干预 治疗提供了新的药物选择。 PU．399 法舒地尔通过抑制凋亡改善横纹肌溶解导致的急性肾损伤 王远大张利刘翔飞魏日胞陈香关 解放军总医院肾脏病科全军肾脏病研究所肾脏疾病国家重点实验室 100853 【摘要】目的：横纹肌溶解导致急性肾损伤是横纹肌溶解的严重并发症之一，目前临床以 对症支持及血液净化为主要治疗手段，因此探索新靶点的药物治疗横纹肌溶解肾损伤具有重 要的意义。本研究旨在探讨法舒地尔对横纹肌溶解肾损伤是否有治疗作用，并探索其作用机 制。方法：Wistar雄性大鼠200-2509，随机分为对照组、模型组和治疗组，每组10只。 3组均禁水24小时后，肌肉注射50％甘油生理盐水溶液 7ml／kg 制作横纹肌溶解肾损伤 11 模型，对照组注射生理盐水 7ml／kg ，治疗组提前3天给予法舒地尔腹腔注射 20mg／kg 日 。3组于“小时全部处死，检测血肌酐、尿素氮，并通过组织病理和TUNEL染色检测 肾组织损伤程度及细胞凋亡程度来评价药效，采用westem．blot检测Rho激酶特异性底物 VS17．23+0．80 著性差异 222．90+47．3umol／I umol／I P 0．01 。给予法舒地尔后，治疗组 umolllVS 血肌酐明显降低 70．34+20．86222．90“7．3umol／1 P 0．01 。模型组同对照组 mmol／IVS 比较，尿素氮显著升高 46．30+13．88 7．03+1．30mmol／I P 0．01 。经法舒地尔治 mmol／IVS 3．88 疗后，治疗组血尿素氮明显降低 29．28+8．95 46．30+1mmol／I P 0．05 。 VS 同对照组比较，模型组肾小管-间质损伤评分明显升高 151．6+22．351+8．2 P 0．05 ， VS151．6+22．3 P 0．05 。 给予法舒地尔后，治疗组肾小管．间质损伤评分改善 121．8+13．g VS TUNEL染色提示，对照组仅有少量细胞凋亡，模型组的凋亡评分明显升高 37．85+6．32 VS