瘦蛋白对犊牛肝细胞PC mRNA表达及其活性的影响.pdfVIP

维普资讯 吉林农业大学学报 2008，30(3)：344～347 http：／／xuebao．jZa．．edu．cn Journalof稀inAgriculturalUniversity E-mail：flndxb@ ．sina．com 瘦蛋白对犊牛肝细胞 PCmRNA 表达及其活性的影响 陈承祯 ，刘国文·，谢光洪·，杨文艳2，张嘉保 ，王 哲 (1．吉林大学实验动物中心，长春 130062；2．吉林农业大学动物科技学院，长春 130118) 摘 要：取单层培养72h生长 良好 的犊牛肝细胞，采用单 因素重复试验，分别添加0，2．5，5．0，10．0，50．0， 100．0ns／mL的牛重组牛瘦蛋白(Leptin)，每个处理3个重复(每重复2孔)。再培养 12h后分别提取RNA并制 备细胞上清液。应用荧光定量PCR方法检测外源 leptin对肝细胞糖异生关键酶丙酮酸羧化酶 (Pyruvat~cal-- boxylase，PC)基因表达的影响，同时用比色法检测其对肝细胞Pc活性的影响。结果表明：一定浓度的Leo~n显 著抑制了肝细胞PC mRNA表达，降低了PC 活性。 关键词 ：瘦蛋 白；丙酮酸羧化酶；肝细胞 中图分类号：$858．236．5；o522 文献标识码：A 文章编号：1000-5684(2008)03．0344．04 EffectsofLeptinonPyruvateCarboxylasemRNA Expression andActivityin VitroCultureBovineHepatocyte CHEN Cheng—zhen ，LIU Guo—wen ，XIEGuang—hong ，YANG Wen—yan ，ZHANG Jia—bao ， WANGZhe (1．CenterofExperimentalAnimals，JilinUniversity，Changchun130062，China；2．CollegeofAnimal ScienceandTechnology，JilinAgricultural ，Changchun130118，hCina) Abstract：A singlefacotrduplicatetestwasdesignedtoinvestigatewhetherleptinaffectstheexpression ofpyruvatecarboxylase(PC)mRNAandhteactivityofPCinvitroculturebovinehepatocyte．I_epfinWas addedtohtemediawith0，2．5，5．0，10．0，50．0nad 100．0ns／mL．AbundnaceofPCmRNA in vitro culture bovinehepatocyteculturedfor12hoursafterleptinWas addedWas determinedbyreal—timefluo— reScencequnatitativeRT—PCR，nadactiviytofPC Was determinedbycolourimetry．Theresultsshowed htathteleptincouldrestrainhteexpressionofPCmRNA nadhteactivityofPEPCKinvitroculturebovme hepatocyte． · Keywords：leptin；pyruvatecarboxylase；hepatocyte 酮病是奶牛常见多发的代谢性疾病，该病的 的作用_lJ。瘦蛋 白(Leptin)是 由肥胖基因(Obese 根源之一是体 内糖代谢紊乱，低血糖症(肝糖异生