不同工艺条件对酶法提取牛蒡多糖的影响.pdfVIP

第 22 卷第 12 期 徐 州 工 程 学 院 学 报 2007 年 12 月 Vol. 22 N o . 12 Jour n al of Xu zh ou In st tut e of T echnology DE C1 2007 不 同 工 艺 条 件 对 酶 法 提 取 牛 蒡 多 糖 的 影 响 董玉玮, 苗敬芝, 曹泽虹, 高明侠, 吕兆启 ( 徐州工程学院, 江苏 徐州 22 1008) =摘 要 以牛蒡为原料, 采用双酶水解法提取多糖, 分别对多糖提取温度 、p H 、固液 比、酶解 时间、酶解温度 、加酶量等条件及 Sev eage 脱蛋 白法进行探讨. 结果表明: 双酶提取多糖最佳条件为 10% 木瓜蛋 白酶和 20% 植物水解蛋白酶各酶解 4h, 固液比 1B 15, pH 8. 0 , 温度 45 e , 多糖提取率 为 12. 4 0% . =关键词 牛蒡; 双酶; 提取; 多糖; 水解 = 中图分类号 Q814 =文献标识码 A =文章编号 1673- 0704( 2 007) 12- 0020- 04 [ 1- 2] [ 3] 近年来, 国内外采用酶法提取植物多糖 的报道不少 , 但提取牛蒡多糖 的报道不多 . 降低 了提取多 糖具有快速、高效、反应温和、易控制等诸多优点. 因此本文选用双酶水解工艺提取牛蒡多糖. 1 材料、试剂与方法 1. 1 实验材料 鲜牛蒡: 从徐州大润发超市购 回. 1. 2 实验试剂 胰蛋 白酶( 活力 \ 2500u/ g) , 酸性蛋白酶( 活力 5 万 u/ g) , 中性蛋白酶( 活力 13 万 u/ g) , 木瓜蛋白酶( 活 力 30 万 u/ g) , 碱性蛋白酶( 活力 30 万 u/ g) , 植物水解蛋白酶( 活力 80 万 u/ g) , 果胶酶( 活力 10 万 u/ g) , 纤 维素酶( 活力 10 万 u/ g) . 本实验所用其余试剂均为分析纯. 1. 3 实验方法 1. 3. 1 酶法提取牛蒡多糖 ( 1) 牛蒡 的预处理: 用水洗净、去皮、切块, 按 固液 比 1B 15 加水打浆. ( 2) 牛蒡 的酶水解: 浆液调 pH 为 7, 分别加纤维素酶、胰蛋白酶、果胶酶、木瓜蛋白酶、植物水解蛋白酶、 酸性蛋 白酶、中性蛋 白酶、碱性蛋白酶, 加酶量都为 15% , 45 e 下酶解. 然后置于 95 e 水浴 中灭酶 10m n 、冷 却、离心, 去渣滓, 取上清液测多糖含量. 1. 3. 2 还原糖 的测定 ( 1) 葡萄糖标准溶液的配置: 精确称取 105 e 烘箱 中干燥 的标准葡萄糖 1g 于 100m L 容量瓶 中, 定容后 放 4 e 冰箱中备用. ( 2) 标准 曲线 的制作: 分别取葡萄糖溶液 0mL 、0. 05m L 、0. 10m L、0. 15mL 、0 . 20mL 、0. 25m L 、0. 30m L、 0. 40mL 、0. 50mL 于具塞试管 中, 补水至 1mL , 向各容量瓶 中分别加入 DN S 溶液 2m L, 沸水浴 2m n, 流水冷 却, 定容. 540nm 处测其吸光值, 以葡萄糖溶液浓度为横坐标, 吸光值为纵坐标, 绘制标准曲线. 1. 3. 3 多糖的测定- 苯酚硫酸法 收稿 日期: 2007- 10- 19 基金项 目: 江苏省高校 自然科学基础研究面上项 目( 07KJD550202) 作者简介: 董玉玮( 1980- ) , 男, 江苏徐州人, 硕士, 主要从事生物工程研究. 通讯作者: 吕兆启( 1935- ) , 男, 江苏徐州人, 教授, 主要从事生物工程研究. # 20 #