蝉拟青霉高产虫草素菌株液体培养工艺的研究.pdfVIP

第 22 卷第 10 期 徐 州 工 程 学 院 学 报 2007 年 10 月 V ol . 22 No . 10 Jo ur nal of Xuzhou In titu t e o f Technology O C T1 2 007 蝉 拟 青 霉 高 产 虫 草 素 菌 株 液 体 培 养 工 艺 的 研 究 李瑞雪 ,胡 　飞 ,陈安徽 ,樊美珍 (安徽农业大学 , 　安徽 　合肥 　230036) 　　【摘 　要 】　为提高蝉拟青霉 RCE F 1081 虫草素 的代谢量 , 以虫草素含量为检测指标 ,用高效 液相色谱法作为检测方法 ,通过正交试验对其高产虫草素 的液体培养工艺进行优化. 结果表 明菌株 RCE F 1081 最佳液体培养基配方为 : 麸皮 3 % ,酵母粉 4 % ,丝氨酸 0 . 15 % , KH2 PO4 0 . 05 % ,M g2 SO4 ·7 H2 O 0 . 01 % ,CaCl2 0 . 02 % ;最佳培养条件为 :起始 p H 值 6 . 0 ,装液量 80/ 250 mL ( V/ V ) , 接种量 5 % (V/ V ) ,培养温度 25 ℃,摇床转速 13 0 r/ min ,培养时间 4d ,在此条件下培养其虫草素含 ( ) 量最高 ,可达 2 . 772 0m g/ g ,比优化前提高了 144 % ,经统计学分析 ,差异极显著 P 0. 01 . 【关键词 】　蝉拟青霉 ; 虫草素 ;液体培养 【中图分类号 】　S47 6 　【文献标识码 】A 【文章编号 】16 7320704 (200 7) 102002 320 8 蝉拟青霉 ( P a ecil omyc e ci c a d a e) , 又名 蝉棒 束孢 菌 ( 霉) ( I a r i a ci ca d a e) , 是我 国传 统 中药 材蝉 花 ( Cor d yc ep obol i f er a) 的无性型菌株 ,与名贵 中药冬虫夏草的无性型为 同属真菌. 蝉拟青霉 的人工培养物 (菌丝体) 具有镇静 、镇痛 、抗辐射 、抗惊厥和解热作用[ 1 - 2] , 而且蝉拟青霉对机体 的毒性甚微. 其主要化学 成分与天然 冬虫夏草 相似 , 有虫草 多糖 、甘露醇 、麦角 甾醇、腺 苷 、氨 基酸 、必需氨基酸 和不饱 和脂肪 酸 等[ 3 - 4] . 虫草素是虫草属多种真菌产生的一种重要 的核苷类次生代谢产物 ,通常作为抗生素使用 ,具有广谱的抗 菌活性. 经研究表 明虫草素具有抑制肿瘤 、抗病毒 、免疫调节 、降血糖和抑制 m RN A 翻译 的作用 ,其 中治疗 白血病 已进入 II 期临床试验[ 5 - 8] ,除其药用外又具有滋补 、保健作用 ,越来越受到人们 的广泛重视 . 冬虫夏草 ( ) ( ) C. i nen i 、蛹虫草 C. m i li t ar i 等多种虫草属真菌均产虫草素 ,但产量较低 ,且 由于虫草具有严格 的寄 生性和特殊的生长条件 ,产量相当有限. 目前 ,人们主要是通过虫草 的人工培养来获取虫草素. 其 中 , 多利用 蛹虫草及其无性型蛹草拟青霉 ( P . m i li t ar i ) [ 9 - 10 ] ,有文献报道其虫草素含量相对较高 ,但也仅为 1. 27mg/ g[9 ] ,且其生长周期较长. 要充分利用虫草素这一有价值的资源 ,就必须找 出高产虫草素 的菌株并寻求提高产 量 的有效途径 . 在较大规模 的活性成分筛选 中 ,笔者首次发现在蝉拟青霉 的人工培养菌丝体 中含