用于PCR检测的扩展青霉基因组DNA提取方法比较.pdfVIP

用于 PCR检测的扩展青霉基因组DNA提取方法比较 ， 何鸿举 ，焦凌霞 ，樊 明涛 刘晓娇 ，吕丽娟 ，魏新元 (1．西北农林科技大学 食品科学与工程学院 ，陕西杨凌 712100；2．河 南科技学院 食品学院，河南新乡 453003) 摘 要 ：为寻找一种经济 、简便 、高效 的基 因组 DNA提取方法 ，进一步开展扩展青霉的分子生物学研究 ，采用 氯化苄法 、玻璃珠法 、玻璃珠+氯化苄法 、试剂盒法 4种方法提取扩展青霉的基因组 DNA，并测定 DNA质量 浓度以及进行 PCR和电泳分析 ，比较不 同提取方法的效果。结果表 明，4种方法均可提取到基 因组 DNA，其 抽提质量优劣依次为试剂盒法、玻璃珠+氯化苄法 、玻璃珠法 、氯化苄法 。其中玻璃珠+氯化苄法提取效率接 近试剂盒法 ，效果 良好 ，并且此法成本低廉 、操作简单 、结果稳定 ，可代替昂贵的试剂盒法用于扩展青霉基因组 DNA 的提取 。 关键词 ：氯化苄法 ；玻璃珠法 ；I)NA 提取 ；PCR 中图分类号 ：Q939．5 文献标志码 ：A 文章编号 2011)020198O4 ComparisonofM ethodsofGenomicDNA Extraction from Penicillium expansum forPCR Detection HEHongju ，JIAOLingxia，FAN Mingtao，LIU Xiaojiao， L0 Lijuan andWEIXinyuan (1．CollegeofFoodScienceandEngineering，NorthwestAFUniversity，YanglingShaanxi 712100，China 2．CollegeofFoodScience，HenanInstituteofScienceandTechnology，XinxiangHenan ,153003，China) Abstract：Theaim wastosearchaneconomic，convenientandhighefficientextractionmethodforge— nomicDNA ofPenicillium pansum toprovidethescientificbasisforfurthermolecularbiologica1 study．ThegenomicDNA ofPenicillium expansum strainswereextractedbyfourmethodssuch as Benzvlchloride，Glassbeads，GlassbeadswithBenzylchlorideandZR Funga1DNA Kit，andtheeffects ofthedifferentextraction methodswerecompared throughthequalitydetectionandPCR analysis． TheresuhsshowsthatthesefourextractionmethodsallcouldextractthegenomicDNA andtheiror— deroftheextractionqualityfrom goodtobadwasZR FungalDNA Kit，GlassbeadswithBenzyIchlo— ride．G1assbeadsmethod，Benzylchloridemethod，andthemethodofGlassbeadswithBenzylchloride issimpleandaccuratewithagoodreproducibility，which canreplacetheKitfortheextraction ofge— nomicDNA from Penicillium e~parlsulH． Keywords：Benzylchloridemethod；Glassbeadsmethod；DNA extraction；PCR 扩展青霉 (Penicilliumexpansum)是一种多