化学修饰对川泽泻凝集素生物学活性和构象的影响.pdfVIP

2O14年 9月 四川大学学报 (自然科学版) Sep． 2014 第 51卷 第 5期 JournalofSichuanUniversity(NaturalScienceEdition) Vo1．51 No．5 doi：103969／j．issn．0490-6756．2014．05．034 化学修饰对川泽泻凝集素生物学活性和构象的影响 刘 超 ，刘 芳 ，伏秦超 ，徐小超 (1．乐山师范学院峨眉山生物多样性保护与利用研究所 ，乐山614000；2．成都学院生物产业学院，成都 61O106) 摘 要 ：用特异性化学修饰和荧光光谱的方法分析川泽泻凝集素 (APL)活性位点氨基酸的分 布情况．研究结果发现 ，色氨酸的化学修饰使活性降低 8096／，统计出每分子APL含有 2个色 氨酸残基 ，一个色氨酸位于凝集活性 中心 ，另一个位于分子表面的疏水袋中，与凝集活性无 关．精氨酸的化学修饰使活性 降低 50 ，半胱氨酸的化学修饰使活性完全丧失．天冬氨酸、 谷氨酸、酪氨酸、丝氨酸 ／苏氨酸等化学修饰后凝集活性无明显变化．表明色氨酸、精氨酸和半 胱氨酸对凝集素的凝集活性 中心的构成起重要作用，天冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、丝氨酸／苏氨 酸等氨基酸位于凝集素的凝集活性 中心附近 ，只是在 维持凝集素分子的构象上具有一定的作 用 ． 关键词 ：川泽泻凝集素；化学修饰 ；荧光光谱 ；凝血活性 ；构象 中图分类号 ：Q51 文献标识码 ：A 文章编号 ：0490—6756(2014)05—1069．06 Effectsofchemicalmodificationonthebiologicalactivityandconformation ofthelectinfrom Alismaplantago—aquatica LJUChao ，LIUFang ，F己，Qin—chao ，XUXiao—chao ， (1．InstituteofProtectionandUtilizationofBiodiversityofEmeiMountain，LeshanNormalUniversity，Leshan 614000，China；2．FacultyofBiotechnologyIndustry，ChengduUniversity，Chengdu610106，China) Abstract：ThisresearchaimedtostudytheaminoaciddistributionofAPLinactivitysiteusingchemical modificationandspectrumanalysis．TheresultsshowedthatTrp—modifiledAPLhad80％ofthehemag— glutinatingactivitylost，andtwotryptophan residuesin thelectinwerecalculated ． Oneofthetrypto— phanresiduesforhemagglutinationactivityhasadirectrolewhiletheotherwasburiedinthehydropho— bicshallow groove．Thehemagglutinatingactivity ofArg—modifiedandCys—modifiled lectin decreased 50 and100 ，respectively．ThemodificationsofothergroupssuchasTyr，Glu，AspandSer／Thr didntaffectthehemagglutinatingactivityofAPL obviously．TheresultsindicatedthatTrp，Argand Cysresidueswereessentialtothehemagglutinatingac