改良培养基生产仔猪副伤寒活疫苗的研究.pdfVIP

《江西畜牧兽医杂~)2o15年第 1期 ·粤 盒研究 · 文章编号：1004-2342(2015)Ol一0016-02 中图分类号：$855．F2 文献标识码：B 改 良培 养 基 生产 仔猪 副 伤寒 活 疫 苗 的研 究 李宏英，李强华 (中牧实业股份有限公司江西生物药厂，江西 南昌 330200) 摘要：为提高仔猪副伤寒活疫苗质量，降低生产成本，使用某培养基生产企业生产的仔猪副伤寒干粉培养基，添加0．75％ 的水解乳蛋白，配制成合成培养基(以下称改良培养基)，用于仔猪副伤寒活疫苗(c5oo株)的生产，同时与 自制培养基进 行比较。结果表明，改良培养基培养的活茵数平均达：~x]515xlOsCFUm·L-，高于自制培养基水平(450x108CFUm·L-t)；改 良培养基生产的 活疫苗活菌率达5O％以上，分别用兔做安全检验、产品经12个月的保存后计活茵数，均符合 《中华人 民共和国兽药典)2010年版三部[1]的质量要求。试验表明，改良培养基替代 自制培养基用于仔猪副伤寒活疫苗(c5oo~) 的生产是可行的，并能降低生产成本。 关键词：仔猪副伤寒；改良培养基；菌液活茵数 仔猪副伤寒是 由猪霍乱沙 门氏菌 (almonella 琼脂培养基、葡萄糖蛋 白胨培养基(江西生物药厂)。 eholeraesuis)引起的急性 、亚急性或慢性传染病，它 1．4菌种 是一种条件性传染病。主要发生于2～4月龄仔猪， 猪霍乱沙门氏菌C500弱毒株(CCVCC795o0)来 急性病例表现为败血症，慢性病例表现为消瘦和坏 自江西生物药厂 。 死性肠炎。该病全国都有发生，对养猪业的危害很 2 方法 大，预防该病主要使用弱毒活疫苗翻。 《中华人民共 2．1 自制培养基生产仔猪副伤寒活疫苗方法 和国兽用生物制品操作规程12000年版圈(以下简称 2．1．1含 l％～1．5％蛋 白胨的普通肉汤培养基制备。 “规程”)中仔猪副伤寒活疫苗的生产主要采取灌体 使用冻冰牛肉、崩谣 白胨、氯化钠，按 “规程”要求配 培养 ，培养基是由生产企业 自行配制的含 1％～1．5％ 制成营养肉汤，使用 8％氢氧化钠调节pH7．2～7．6， 蛋 白胨的普通肉汤。商品化仔猪副伤寒干粉培养基 进罐培养基 30xl04mL。 使用方便，按一定比例加入注射用水配制即可。为 2．1．2培养基在线灭菌液体。培养基使用水泵通过管 保证产品质量 ，降低生产成本 ，对仔猪副伤寒干粉 道打进罐内，加入猪油做消泡剂，116℃灭菌40min。 培养基进行了改 良，分别对改 良培养基与 自制培养 2．1．3细菌培养及菌液制备。生产用一级种子和二级 基生产的产品的质量和成本进行了比较。 种子按 “规程”要求进行选育和繁殖，进灌培养按 1 材料 2％的接种量接入二级种子，通气培养，每小时测 pH 1．1主要材料 值一次，pH值超过 7．5以上时用40％葡萄糖溶液调 牛肉 (自购黄牛肉)、麻 蛋 白胨 (北京奥博星 节 pH值，培养至 21h结束，使用冷却水冷却后续流 )、仔猪副伤寒干粉培养基(某厂)、水解 高速离心浓缩 ，收集菌体取样进行纯粹检验和活菌 乳蛋 白(美国BD公司)、猪油(定点购买)，葡萄糖 、 计数，24h后根据活菌计数结果，决定每头份的投入 氯化钠、氢氧化钠、明胶、蔗糖，均购 自上海国药集团。 活菌数 ，加一定比例的明胶蔗糖保护剂，配苗、分 1．2实验动物 装、冻干、轧盖、贴签。 普通级大