针刺对肠易激综合征大鼠NO及NOS水平的影响.pdfVIP

清洁级雄性 SD 大鼠 30 只，（由北京维通利华实验动物技术有限公司提供）， 体重（110±30）g，合格证号: SCXK(京)-2008-0004 。称量各大鼠体重后，依据体 重将大鼠随机分为空白组、模型组、电针组，每组 10 只。 1.2 模型制作方法 参照用 AL-Chaer 内脏敏感动物模型为基础，稍改进。使用自制的刺激球囊 [5,6]，蘸少许医用石蜡油，自大鼠肛门轻柔插入4～5 cm 。每次气囊打气，维持肠 道压力 60 mmHg，保留 1 min，然后撤气。每次刺激之前，检查球囊的密闭性; 给予扩张刺激前，可预先刺激大鼠肛门部，使其排尽大便，以减少粪团对扩张程 度的影响。每天操作一次，共持续刺激 15d。 1.3 治疗方法 电针时取大鼠双侧“上巨虚” 穴，使用华佗牌 28 号、25mm 毫针，通过 G6805-1A 型电针治疗仪，采用疏密波，密波 100HZ/3S，疏波4HZ/3S 交替，刺 激强度 1-3mA，以大鼠后肢轻轻抖动但不产生嘶叫为度，持续 20 min 。隔日针 刺 1 次，持续 10d。正常对照组每日陪同电针组抓取、固定，不做任何治疗。模 型组按上述方法进行球囊刺激法造模。 1.4 检测指标及方法 （1）标本采集 将大鼠麻醉后，先用剪刀沿耻骨联合上缘横向剪开，再沿腹白线向上剪开至 剑突处使其翻开，进而暴露整个腹腔，把大小肠推出腹腔，放于大鼠左侧，充分 暴露大鼠的腹腔右侧，用干棉球擦试，于腹主动脉，抽取 5ml 血液放入离心管中 静置 2～3 小时，待血凝后以 3500 转/分离心 10 分钟，分离血清 500μl，放入EP 管中，置于-80℃冰箱贮藏备用。空白组、模型组在模型制备结束后进行血液采 集，电针组从造模完成后隔日针刺 1 次，10d 后进行血液采集。 （2 ）检测指标及试剂盒 采用分光光度计比色法检测 NO 含量和 NOS 水平。NO 、NOS 试剂盒由武 汉博士德生物工程有限公司提供，严格按照试剂盒说明的操作程序测定大鼠血清 NO 和 NOS 含量。 1.5 统计分析 数据均以平均值±标准误表示。用 SPSS13.0 for Windows 统计软件包处理，多组间 630 计量资料采用单因素方差分析。 2 结果 各组大鼠血清 NO 、NOS 含量的比较见下表 1。 x 表 1 各组大鼠血清 NO 、NOS 含量的比较（ ±SE ） 组别 n NO （pmol/L ） NOS （pmol/L ） 模型组 10 91.19±9.11 51.85±10.01 电针组 10 64.12±12.012 ） 29.22±8.381） 正常组 10 57.81±10.311） 25.82±9.711） 注：1）与模型组比较P0.01 ；2 ）与模型组比较P0.05 。 模型组大鼠血清 NO 、NOS 水平均显著升高，电针组较之均有不同程度的降低， 其中电针组与模型组比较，NO 含量差异有显著意义(P0.05) ，NOS 水平差异显著 (P0.01) 。 3 讨论 上巨虚穴属足阳明胃经，是手阳明大肠经的下合穴。根据“合治内腑” 的理论，大 量的文献和临床研究表明，上巨虚穴具有清热利湿，调理肠腑的功能。IBS 是肠道功能 [6] 紊乱的功能性疾病，病因及发病机制尚未清楚，但与胃肠激素关系密切。如前所述 ， AL-Chaer 等开发的模拟慢性内脏痛动物模型中，痛觉过敏伴随着动力紊乱，类似于 IBS 患者的动力失调。 NOS 广泛分布于消化道，存在 3 种同功酶，其主要功