针刺对神经病理痛大鼠模型脊髓背角神经元中枢敏化的干预作用.pdfVIP

著提高 SNI 模型大鼠机械痛阈；显著抑制伤害性传入神经末梢释放 Glu ；显著抑 制伤害性刺激诱导的脊髓背角 LTP ，以及下调脊髓腰段神经元与中枢敏化相关受 体亚单位蛋白及其 mRNA 的表达。结论：电针通过对脊髓神经元Glu、LTP 的影 响，引起相关亚单位NR 2B 蛋白及其 mRNA 表达的显著下调，达到调整 SNI 大 鼠痛信息调控机制的作用。 [关键词] 神经病理性疼痛；脊髓背角；谷氨酸（Glu ）；LTP ；NR 1 －NR 2 B － GluR 1 ；痛信息调控机制 神经病理痛是临床常见的慢性疼痛综合征。其发病机制一般倾向于痛信息调 控机制发生了紊乱引起。目前认为，兴奋性氨基酸(EAAs)神经递质，尤其是谷 氨酸（Glu ）释放增多及其相应受体被异常激活，通过细胞内信号转导和级联反 应，进一步使受体的效能上调，引起突触后神经元的兴奋性异常增高，最终导致 的脊髓背角神经元中枢敏化[1]，从而诱发一系列神经病理痛症状，比如，痛觉过 [2] 敏、痛觉超敏和自发性疼痛。中枢敏化能使镇痛药产生耐药性 ；而比较有效的 [3] 作用于痛信息调控机制的药物，多属麻醉精神科药物 ，临床应用非常局限。所 [4] 以，神经病理痛的治疗在临床上始终是一难题 。针刺镇痛的研究文献显示，电 针(EA)可显著改善神经病理痛动物模型的痛阈[4] ；国内外在临床治疗方面也取得 很多进展[5-6] 。我们新近对此进行了研究，简述如下。 1 研究方法 1.1 实验动物和模型制备方法以及痛阈测定 制备成大鼠神经病理性疼痛坐骨神经分支选择性损伤模型(SNI)，分为模型 组和电针治疗组；对照组暴露分离神经后不予处理。电针于造模后第 8 天开始， 穴位：环跳、委中，2Hz ，1mA，30min，共 7 天。于模型制备的前一天，造模 后的次日、第 7 天、第 14 天用足底触觉测定仪分别测定大鼠清醒活动状态下的 机械痛阈。然后进行下述实验研究。 1.2 微透析和样品处理 微透析于造模后第 14 天测痛后进行。大鼠麻醉后用脊椎夹固定于立体定位 仪，将微透析针垂直插入 L4 脊髓表面下 1mm，微透析流速 1μl/min，平衡 90min， 然后收集 60min 的透析液（约 60μl ）。冷冻干燥后备用。用OPA 柱前衍生＋荧光 反相 HPLC 法测定微透析液中兴奋性氨基酸神经递质 Glu 的含量。 132 1.3 微透析完毕，大鼠心尖灌流 4%多聚甲醛固定，取下 L 、L 节段脊髓，用免 4 5 疫组化法观察传入神经 Glu 阳性神经终末的表达。 1.4 第 14 天测痛后用电生理方法，在 SNI 大鼠上诱导检测脊髓背角神经元突触 传递长时程增强（LTP ）。 1.5 第 14 天测痛后摘取新鲜腰段脊髓，用分子生物学（Western blot 和 RT-PCR ） 方法，观察电针对神经病理性疼痛和中枢敏化相关主要受体亚单位蛋白及其 mRNA 表达的影响。 2 结果 2.1 痛阈观察[7-10] 大鼠未造模前痛阈一般在 24～28g ，造模次日降至 18.1±3.6g，以后进行性加 重，第七日为 13.8±0.6g，与对照组比较，存在显著性差异（P0.01 ）；电针后 痛阈提升，7 日后恢复至 23.3±3.0g ，与正常大鼠相近（25.0±2.3g ），与模型组 （13.6±0.7g）存在显著性统计学差异（P0.01 ）。 2.2 脊髓背角微透析液中 Glu 含量以及传入神经 Glu 阳性终末的分布[7-8] 正常大鼠 60min 脊髓背角微透析液中 Glu 一般为 0.24～0.25μmol/L ，模型组 则为 0.64±0.29μmol/L ，显著高于正常大鼠（ P0.01 ）；模型大鼠电针干预后Glu 降至 0.23±0.13μmol/L ，