CK20免疫细胞化学检测在诊断尿路上皮癌中的价值.pdfVIP

别(均为PO．0001)。结论尿脱落细胞CK20ICC检测可以辅助LBC，提高UC 诊断的敏感性。 【关键词】尿路上皮癌，细胞学，CK20 ial 膀胱癌发病率居恶性肿瘤的第9位[1]。其中，膀胱尿路上皮癌(Urothel 诊断和监测膀胱癌最常用的技术，但膀胱镜是有创检查，能引起患者不适；而尿 液细胞学检查敏感性低，尤其是对低度恶性尿路上皮癌[3]。近年来FDA批准了 一些肿瘤标志物辅助尿液细胞学检查，如ImmunoCyt，BTATRAK，BTAstat， NMP22，NMP22BladderChek，andUroVysion等，已经证实这些肿瘤标志物筛查 膀胱癌的敏感性比尿脱落细胞学高(平均敏感性为64-80％)；而特异性并不高于 尿细胞学(平均特异性为71-95％)。并且他们中大多数操作较细胞学复杂，价格 较细胞学高。 细胞角蛋白(Cytokeratin，CK)是细胞骨架蛋白家族之一中间丝的组成成 分，是上皮分化的可靠标志物。CK20是Moll等1990年采用免疫印迹法及免疫 细胞化学法筛选出一个新的细胞角蛋白，其表达于胃肠道腺上皮细胞，Merkel 细胞以及部分尿路上皮细胞。进一步研究发现CK20在尿路上皮的表达和分化程 度有关。在正常的尿路上皮中，CK20的表达限于大的分化成熟的表层细胞(伞细 胞)，偶尔也可表达于少数中层细胞，而在小的未分化的基底层细胞不表达。但 当尿路上皮出现异常分化时，此种表达的限制性就会消失[4—6]。CK20的这种表 达特点为其在诊断尿路上皮癌中的应用提供了依据。本研究采用尿液基细胞学标 本，通过前瞻性研究和回顾性研究两种方法探讨CK20ICC辅助尿液基细胞学诊 断尿路上皮癌的意义。 ·241· 术才阵动法 研究人群在前瞻性研究中，收集的尿液标本来自中国医学科学院肿瘤医院泌尿 外科就诊者。在回顾性研究中，选取中国医学科学院肿瘤医院细胞学室档案中尿 LBC诊断为非典型尿路上皮细胞，可疑癌和癌的病例，并且这些病例不包括在前 瞻性研究中。 液基薄片的制做在前瞻性研究中，嘱患者收集新鲜的中、末段尿液于盛有 Cytolyt液(Cytyc 细胞转入PreserveCyt液(Cytyc 2000液基制片 Corp．，U．S．A)，用ThinPrep 机制片。每例标本制做液基薄片2张，1张进行巴氏染色供细胞学诊断，l张进 行CK20免疫细胞化学标记。回顾性研究中，在细胞学尿液LBC档案中每例选一 张巴氏染色ThinPrep薄片。液基薄片上细胞量少于100个者不纳入本研究。 CK20 ICC ICC检测采用CK20Envision法，应用标准非生物素化HRP检测系统。 抗原修复采用微波加热法，修复时间为10分钟。3％H20：孵育10分钟以阻断内 源性过氧化物酶作用。1：50的一抗(Zymed，U．S．A．)孵育1小时，二抗孵育20 分钟，DAB显色，苏木素复染核(北京中杉金桥生物有限公司，中国)。在回顾 性研究中，采用已经进行过细胞学诊断的尿液基细胞学档案片，在光学显微镜下 选择其中形态异常细胞，用钻石笔进行标记并拍照，经二甲苯脱胶、酒精脱色后， 对所标记的细胞进行上述免疫细胞化学检测。 数据分析细胞学诊断由中国医学科学院肿瘤医院两位细胞病理医师分别进行， 并共同讨论诊断意见不完全一致的病例。细胞学诊断结果分为癌(carcinoma， carcinoma CA)，可疑癌(SuspiciousSuCA)，非典型尿路上皮细胞Qtypical urothelial celis，AUC)，阴性‘1egativoNEG)四个级别；诊断标准参照‘Modern 标记阳性判断标准为除表层细胞外5个以上细胞的胞浆有明显棕黄色颗粒。所有 诊断均双盲法进行。以最终组织学诊断结果作为金标准进行分析。获得组织学结 果的随访时间，在前瞻性研究为18个月，在回顾性研究为33个月。组织学诊断 ·242· 由中国医学科学院肿瘤医院病理科医师做出。应用SASV8统计学软件处理数据 各组率的差别分析采用x2检验