去泛素化酶US7与ULF、ARF蛋白相互作用的研究.pdfVIP

摘要 摘要 肿瘤抑制蛋白ARF由珊K缸，4尉瑾因座所编码，在抑制肿瘤发生方面发挥着 重要的作用。AI强蛋白主要通过激活p53信号通路，引起细胞周期阻滞或凋亡， 从而抑制肿瘤的发生。另外，ARF蛋白还可以通过非p53依赖性途径发挥其肿瘤 抑制功能。 由于ARF在肿瘤抑制方面的重要作用，细胞中存在多种方式对ARF的表达进 行严格、精细的调控。其中由ULF介导的泛素化是从转录后水平对ARF蛋白进行 调控的重要方式。 蛋白的泛素化是一个可逆的过程。去泛素化作用对许多重要蛋白的水平和功 能发挥着关键性的调控。参与蛋白去泛素化的特异性水解酶(去泛素化酶)是一 类蛋白酶超家族，USP7则是其中一个重要的成员。 我们的工作在前人研究基础上，利用免疫共沉淀技术，证实了去泛素化酶 USP7与舢玎的泛素连接酶ULF在细胞内的特异性结合。在此基础上，初步探讨 了这种特异性结合对USP7和ULF蛋白稳定性的影响。我们发现，二者结合对USP7 的蛋白稳定性没有影响，但是却能增强ULF的蛋白稳定性。经过进一步的研究发 现，USP7对ULF的稳定效应与USP7的去泛素化酶效应相关，说明USP7很有可能 去泛素化ULF。另一方面，我们利用免疫共沉淀和GSTdown技术，发现USP7 pull 还可以和细胞中重要的肿瘤抑制蛋白ARF结合，相关的研究仍在进行中。该研究 对于探索细胞中调控由ULF介导的AI强泛素化降解这一过程有一定的意义，也为 后续的进一步深入研究打下了基础。 关键词：AI强，ULF，USP7。 Abstact Abstract T1IeARF isa of刃v：^-亿卜4RF acmcialroIeintumor locus，it proteinproduct plays the Stabilizes resuItsinactiVated suppression．ARFp53．111is p53signalingpathway 锄dmediatedcell arrestor tumor canalso cycle apoptosis．ARF-mediatedsupprcssion occurinap53一independentpathway． StabilizationofARFis foritstumor funtion．There specificallyrequired suppresSor are inVolVedinthecon臼．0l the m锄yregulato叮mechanisms ofARF．Amongregula· an aS isinVolVedinthe tions，ULF-mediated ubiquitinationimponantparrtem poSt· 打anscriptionalregulations． Sim订art0 0therreVersible is post-translationalregulations，ubiquitination rcverseble．The specifichydrolaScs(deubiquitinatingenzymes，DUB