红曲霉9901液态发酵产莫纳可林K的发酵条件.pdfVIP

维普资讯 丝 丝 ．— — 红曲霉9901液态发酵产莫纳可林 K的发酵条件 陈 晔 朱 华 许赣荣 (江南大学生物工程学院，无锡，214036) 摘 要 对红曲霉9901产莫纳可林K的液态发酵培养基的组成和发酵条件进行了研究，确定出 以甘油为碳源，大豆水解液为氮源，C／N 比为 10／1的最佳培养基组成，得 出9901液态法产莫纳可 林K的最适pH为4．5，温度 26℃，接种量为 5％(体积分数)，发酵时间 14d。通过实验，摇瓶发酵 的莫纳可林K含量可以达到 1600mg／L，在 15L小型发酵罐实验 中，莫纳可林 K含量可达到 888．9mg／L。 关键词 红曲霉，莫纳可林K，液态发酵 1979年，日本的Endo等发现了红色红 曲 1．3 培养条件及方法 霉(M ．ruber)能够产生强力的降胆固醇物质莫 刮 1环，在将斜面培养基上生长 7d的菌 纳可林 K(MonacolinK，MK)uJ。传统的固态 体 ，接到装有 100mL种子培养基的500mL三 发酵生产方式，主要缺点是 ：发酵周期较长，人 角瓶中，在往复式摇床上 (行程 10cm，70～80r／ 力投入大，生产效率低，生产能力和产品质量参 min)振荡，30℃下培养 2～2．5d。 差不齐。 目前适用于功能性红曲的固态发酵设 液体摇瓶发酵在 500mL三角瓶中进行，装 备还处于研发阶段，还不能解决长时间发酵而 液量 100mL，种子液接种量为 5％(体积分数)。 可能带来的杂菌污染问题及适宜的基质水分控 在往复式摇床 (行程 10cm，70～80r／Tnin)振 制问题。与传统固态发酵法相 比，液态发酵法 荡，28℃下发酵 14d。 具有规模大，自动化程度高，人力成本低，生产 1．4 菌体量测定方法 过程中易控制杂菌污染等显著优点。作者利用 菌体量采用干重法测定。取一定体积发酵 红 曲霉 9901菌进行红 曲发酵研究了发酵培养 液，用 3层纸 巾过滤，清水洗涤2遍，50～60℃ 基、液态发酵工艺条件。 烘干至恒重 。菌体量计算公式 ： 菌体量(L)=干物质质量(g)／发酵液体积(L) 1 材料和方法 1．5 发酵液中残余甘油含量的测定 1．1 菌 种 发酵液 中的残余甘油含量用高碘酸氧化滴 红曲霉 9901为本实验室保藏菌株。 定碘法测定 4【]。发酵液研磨后恢复至初始体 1．2 培养基 积，取出5mL，稀释至 100mL，静置 10min后 斜面培养基 ：土豆培养基。 取用滤纸过滤部分上清液，取 2～5mE滤液 种子培养基 (g／L)：葡萄糖 60，蛋 白胨 25， (．。，控制其中所含的甘油量不高于 25mg)至 NaN032，MgSO4·7H2O1，K2HP04·3H2O1，玉 50mL三角瓶中，加水 20mL，加入 0．023mol／ 米浆 10mL／L，pH5．0。 L高碘酸钾溶液 25mL，静置 120s。加入 20％ 摇瓶发酵培养基 (g／L)：甘油 100，大豆水 碘化钾溶液 15mL，6mol／LHCI溶液(或3mol／ 解液 25，NaNO32，MgSO4·7H2O 1，K2HP04· LHaSO4溶液)15mL，然后用 0．1ln0l／L硫代 3H2O 1，ZnSO4·7H2O 2，玉米浆 10mL／L， 硫酸钠标准