转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响.pdfVIP

￡垫也!丛!坠塑婴!亟墨!卫!!堡坠笪2Q!!，yQ!』垒：丛Q：! ·905· 生堡塑墅匡堂苤查至Q!!生窆旦箜!垒鲞箜里塑 ·基础研究 1一G93A对NSC一34细胞内 转染hSOD 铁代谢相关蛋白表达的影响 王寿刚 陆玉成 黄丽梅 尤翠平 王龙 王富敏 苏全平 于继徐 车峰远 方 【摘要】 目的探讨转染hSODl．G93A对NSC一34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响。 法 粒的NSC一34细胞系：分为正常组、空转组、野生组和突变组。利用免疫组化染色法观察各组细胞的 形态变化：通过检测丙二醛(MDA)含量观察各组细胞氧化应激水平；用逆转录聚合酶链式反应 结果 fRT．PCR)和Westernblotting分别检测各组细胞内铁代谢相关蛋白的基因和蛋白表达水平。 突变组的细胞胞体变圆．突起减少、变短．细胞内MDA含量明显高于其他3组细胞，差异有统计学 意义(P0．05)；各组细胞内的转铁蛋白受体(TtR)、二价金属离子转运体1(DMTl)、铁蛋白等基因在 基因水平上表达差异无统计学意义(p0．05)；各组细胞内的TfR、DMTl、铁蛋白等在蛋白水平上表 达差异无统计学意义(尸O．05)，但是突变组细胞铁蛋白表达较正常组细胞明显升高，差异有统计学 结论 转染hSODl一G93A对NSC．34细胞(突变组)内TfR、DMTl表达无明显影 意义(P0．05)。 响，但可以使细胞内铁蛋白在蛋白表达水平明显升高。 【关键词】 肌萎缩侧索硬化； NSC．34细胞；转铁蛋白受体；二价金属离子转运体1 【中图分类号】R741．02【文献标志码】A 【文章编号】 1671—8925(2015)09—0905—05 EffectoftransfectionofhSoDl—G93Aon ofiron—relatedinNSC一34cells expressions proteins Limei，You Fumin，Su WangShougang丰，LuYucheng,HuangCuiping,WangL07峪Wang Quanping,Yu Medical Jixu，CheFengyuan．4Taishancoffege，Taiau271016,China author：l，u CorrespondingJhu，Email：yujixu@163．corn To theeffectoftransfectionofhSODl·G93Aon 【Abstract】Objective expression investigate ofiron—relatedinNSC一34cells． MethodsTheNSC一34celllinesfromfour fwithout proteins groups transfectionor transfectedwith hSODl-G93A—pcDNA3．1 stably pcDNA3．1(一)，hSODl·pcDNA3．1(-)and culturedatroutine ofthetransfectedcellswereobserved (-)plasmids)were ways．Morphologicalchanges immuno-histochemicalmethod．Thecelloxidative wereobserved by