白藜芦醇对高糖诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞MMP-2、MMP-9表达的影响及作用机制研究.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………．…．．5 研究论文 白藜芦醇对高糖诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞MMP．2、 MMP．9表达的影响及其作用机制的研究 前言……………………………………………………………………．．1。0一 日!J吾………一，…………………………………………………………… 材料与方法……………………………………………………………．。ll 结果……………．……………………一…………………………………．20 附图……………………………………………………………………．．23 附表……………………………………………………………………．．28 {对论……………………………………………………………………．．30 结论……………………………………………………………………．．34 参考文献………………………………………………………………．．34 综述基质金属蛋白酶一2、．9与糖尿病大血管病变的相关研究进展……38 致{射…………一…………．．…………………………………………………．51 个人简历………………………………………………………．：……………．52 中文摘要 白藜芦醇对高糖诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞MMP．2、 MMP．9表达的影响及其作用机制的研究 摘 要 目的：糖尿病心脑血管病变是糖尿病的常见慢性并发症之一，也是糖 尿病患者致死的最主要原因。心脑血管病变的发生与长期高血糖状态导致 smoothmuscle 过程中起着关键作用。 基质金属蛋白酶(matrix matrix， 离子的蛋白水解酶家族，能广泛降解细胞外基质(extracellular 的研究是目前的热点，无论是糖尿病患者临床研究、糖尿病动物模型，还 的增加，可见M]V[Ps在糖尿病大血管病变发生中起着重要作用，但是高 糖激活]k4]V[Ps发挥作用的分子机制尚不十分明确。 广泛的生物和药理学作用，除具有抗炎、抗癌、抗氧化、抗衰老、抑制血 小板聚集、调节脂质代谢、免疫调节等作用外，还可以通过抑制VSMCs 的增殖迁移，发挥抗AS作用，从而对心血管起到保护作用。目前有关白 于高糖体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞，观察MMP一2、Mc、口．9表达 性变化是否与P13K信号通路有关，同时探讨白藜芦醇可能的作用机制， 为糖尿病大血管病变早期防治提供新靶点，也为白藜芦醇的I临床应用提供 实验依据。 实验方法： l细胞培养：以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株A7r5(细胞株购自中国培 养物典藏中心)为研究对象。将冻存的血管平滑肌细胞株迅速投入37℃温 中文摘要 清，加入含20％胎牛血清的DMEM培养液5ml混匀，接种于培养瓶中， 放于37℃、5％C02孵箱中孵育，待细胞铺满瓶底的90％后进行传代。取 处于对数生长期的细胞分别接种于50ml培养瓶培养48h，更换于无血清 DMEM培养基再培养24h后进行实验，分组如下： ①正常对照组(NG组，含5．5mmolfL葡萄糖) ②高糖培养组(HG组，含25mmol／L葡萄糖) ③NG+Ly294002组(10、20、301xrnol／L) (至)HG+Ly294002组(10、20、30pmol／L) ⑤NG+Res组(25、50、100jamol／L) 00}tmol／L1 (查)HG+Res组(25、50、1 2应用MTT法检测各组VSMCs增殖活性； 3应用免疫组化方法检测各组MMP．2、MMP．9表达； 4应用明胶酶谱法检测各组MMP．2、MMP．9活性； 5应用Western P．Akt表示活化的Akt。 结果： pO．05)。