寒凝血瘀证模型大鼠IL-1β、TNF-α的变化与卵巢功能的关系及加减温经汤对其影响.pdfVIP

中文摘要 寒凝血瘀证模型大鼠IL一1B、TNF—Q的变化 与卵巢功能的关系及加减温经汤对其影响 摘 要 目的：人类的生殖活动受内分泌调节和免疫调节。月经 病寒凝血瘀证可表现为月经过少、月经后期及闭经等内分泌 失调疾病。本试验通过分析寒凝血瘀证模型大鼠血清和卵巢 组织细胞因子的变化与卵巢功能的关系，揭示寒凝血瘀证妇 科病的部分发病机理，探讨加减温经汤的干预调节机制，为 中医妇科证候研究提供理论和实验依据。 方法：选用动情周期正常(4～5天)的健康清洁级SD 雌性大鼠60只，鼠龄3个月，体重230±209，随机分为6 组，每组10只：即正常对照组(简称为“正常组”)，模型 对照组(简称为“模型组”)，模型加加减温经汤低剂量组 (简称为“低剂量组”)，模型加加减温经汤中剂量组(简 称为“中剂量组”)，模型加加减温经汤高剂量组(简称为 “高剂量组”，低剂量组、中剂量组、高剂量组又合称为“治 疗组”)，桃红四物汤组(简称为“对照组”)。正常组常规 饲养，模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、对照组大 鼠置于0℃～1℃冰水中20分钟，每日一次，连续两周。低 剂量组、中剂量组、高剂量组于造模的第一天开始，分别按 5倍、10倍、20倍)给予加减温经汤灌胃，每日一次，连用 两周；对照组按10．839／kg／日(相当于临床成人剂量的10 倍)给予桃红四物汤灌胃，其它两组给予同体积的蒸馏水。 中文摘要 自造模第一天起，每日定时进行阴道涂片，观察大鼠动情周 期变化。末次造模给药后，禁食8小时，选择动情间期的大 鼠断头取血，制备血清，放免法检测雌二醇(E2)、孕酮(P)、 睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素阻H)、白细胞介 素．1岱(IL．1B)、肿瘤坏死因子．c【(n师．Q)的含量。无菌操 作剖腹取出同一侧卵巢组织，吸去血迹，称重后置于4％多 p 聚甲醛溶液中固定，常规石蜡包埋，5 m厚连续切片，进 行免疫组织化学染色，观察卵巢组织白细胞介素．1B(凡．1 B)、肿瘤坏死因子．Q(n师．Q)、核因子．KB唧．KB)表达 强度。 结果： l大鼠动情周期的变化 模型组大鼠动情周期延长、间期延长，与正常组比较有 显著性差异(均尸O．01)，经加减温经汤治疗，中、高剂量 组动情周期缩短，与模型组比较有显著性差异(尸O．Ol， 耿O．01)：对照组与模型组比较动情周期缩短，但其差异无 统计学意义(P0．05)。各治疗组和对照组动情间期皆缩短， PO．01， 与模型组比较差异均有统计学意义(PO．05，尸O．01 氏0．05)，与正常组之间比较无统计学意义(均尸O．05)。 2血清生殖激素变化 与正常组相比，模型组血清E2、P、T、FSH、LH均显 减温经汤治疗后，低剂量组E2有升高趋势，但与模型组比较 无统计学意义(胗O．05)，中、高剂量组和对照组E2升高， 组P水平升高，与模型组比较均有显著性差异(尸O．05， 中文摘要 水平均高于模型组，除高剂量组外，其余各组与模型组比较 均无显著性差异。高、中、低剂量组和对照组LH升高，与 模型组比较均有显著性差异(均氏O．01)，其中高、中剂量 组和对照组与正常组之间无显著性差异(pO．05)。 3血清IL一1D、n师．Q结果 与正常组相比，模型组血清IL一1p降低，n婚．Q升高(均 B 尸O．01)。与模型组比较，加减温经汤中、高剂量组IL一1 组IL．1B有升高趋势、耵师．Q有降低趋势，但与模型组比较 均无显著性差异(胗O．05)。对照组n师一Q水平降低，与模 型组比较有显著性差异(PO．05)，IL一1B有升高趋势，与模 型组比较无显著性差异(胗O．05)。 4卵巢组织IL—B、n旺一Q、NF．KBP65的表达 4．1卵巢组织IL．1B蛋白的表达情况 IL一1 B阳性表达定位于细胞浆内，为棕黄色染