ⅰ型鸭肝炎病毒p1蛋白优势抗原区的鉴定及间接elisa方法的建立.pdfVIP

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2016-02-20 发布于贵州
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ⅰ型鸭肝炎病毒p1蛋白优势抗原区的鉴定及间接elisa方法的建立.pdf

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ⅰ型鸭肝炎病毒p1蛋白优势抗原区的鉴定及间接elisa方法的建立

量量量甍量量量量量奠篁董量邕曼曼曼曼量曼鼍舅量量皇曼皇皇量置鲁鲁-‘刁口，a罾目录中文摘要…………………………………………………………………………………………．I 英文摘要…………………………………………………………………………………………III l前言………………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1鸭病毒性肝炎概述………………………………………………………………………．．1 1．1．1流行病学………………………………………………………………………………1 1．1．2发病机理……………………………………………………………………………．．1 1．1．3临床症状……………………………………………………………………………．．2 1．1．4病理变化……………………………………………………………………………．．2 1．2DHV-I的流行及分布……………………………………………………………………．．2 1．3DHV-I的分类地位………………………………………………………………………3 1．4DHV-I病原学特性………………………………………………………………………．．3 1．4．1病毒的形态…………………………………………………………………………………3 1．4．2病毒的致病力…………………………………………………………………………3 1．4．．3病毒的理化性质………………………………………………………………………4 1．5DHV-1分子生物学特性…………………………………………………………………．4 1．6诊断方法…………………………………………………………………………………5 1．6·．1病毒的分离与鉴定……………………………………………………………………5 1．6·．2血清中和试验…………………………………………………………………………6 1．6．3酶联免疫吸附试验……………………………………………………………………6 1．61．4琼脂免疫扩散试验……………………………………………………………………7 1．6·．5间接血凝(IHA)………………………………………………………………………．8 1．6．6直接荧光抗体检测(FA)………………………………………………………………8 1．61．8分子生物学诊断技术…………………………………………………………………9 1．7研究的目的和意义…………………………………………………………………………9 2材料与方法…………………………………………………………………………………．．10 2．1试验材料………………………………………………………………………………。10 2．1．1质粒、载体…………………………………………………………………………10 2．1．2病毒、菌种、血清………………………_…………………………………………10 2．1．3主要酶类及试剂……………………………………………………………………．10 2．1．4主要试验仪器设备…………………………………………………………………10 2．2试验方法………………………………………………………………………………。ll 2．2．2目的蛋白的诱导表达及鉴定………………………………………………………．．15 I 东北农业大学农学硕士学位论文 2．2．4 2．2．5特异性试验…………………………………………………………………………19 2．2．6重复性试验…………………………………………………………………………19 2．2．7最低检出量的测定…………………………………………………………………19 3结果………………………………………………………………………………………………………………………。2l 3．1VPl蛋白的分段表达、纯化与抗原性分析……………………………………………。21 3．1．1 VPl蛋白软件分析结果……………………………………………………………2l 3．1．2 3．1．4DHV-E53 3．1．5 3．1．6