猪组织中氟尼辛留量的hplc和lc-msms检测及消除研究.pdfVIP

孙庆猪组织中氟尼辛残留量的HPLC和LC．MS／MS检测及消除研究 研究 ㈣ 摘 要 氟尼辛属于非甾体类抗炎药(NSAIDs)，兽医临床常用葡甲胺作为增溶剂制成氟尼辛的 生成而发挥解热、镇痛和抗炎作用。含氟尼辛的相关制剂在国内兽医临床已批准使用，但 针对动物源性食品中氟尼辛残留量的检测方法还未见报道。因此建立猪组织中氟尼辛残留 量的检测方法不仅有助于对动物性食品中应用此类药物进行监控，而且通过对有关氟尼辛 注射剂在猪体内消除规律的研究，不仅能进一步确证残留检测方法的可靠性，同时为休药 期的制定提供依据，以指导临床合理用药。 1、猪组织中氟尼辛残留量的HPLC检测 化，C18色谱柱进行分离，外标法定量。流动相为甲醇．0．05 mol／L磷酸三乙胺溶液(60／40，v／v, n／n。氟尼辛标准工作液在0．02-5 pH=3．8)，检测波长为333 gg／mL范围内呈良好线性关系 和15 p,g／kg。氟尼辛在肌肉加浓度为25、50、 gg／kg，定量限(LOQ)分别为25、10、30和30 500和1000 gg／kg 间变异系数为3．39％～7．56％。本研究建立的检测方法，其回收率、精密度、灵敏度能满足 猪组织中氟尼辛残留量的检测要求。 2、猪组织中氟尼辛残留量的LC．MS／MS检测 谱柱进行分离，以O．1％甲酸溶液和0．2％甲酸．乙腈溶液为流动相，梯度洗脱；质谱采用电 曲线在0．003～5 脏四种组织的检测限(LOD)为0．6gg／kg，定量限(LOQ)为l gg／kg。氟尼辛在肌肉、皮脂、 孙庆猪组织中氟尼辛残留量的HPLC和LC．MS／MS检测及残留消除研究 II 肾脏、肝脏添加浓度为1、10、500、1000 71．7％～91．4％、71．9％～98．6％之间，日内变异系数4．84％～8．64％，日间变异系数 4．86％～10．03％。本研究建立的检测方法，其回收率、精密度、灵敏度能满足猪组织中氟尼 辛残留量的检测要求。 3、氟尼辛在猪体内残留消除研究 25头商品杂交猪，按2 b．w(以氟尼辛计)的剂量肌注复方氟苯尼考注射液， mg／kg 间隔48h后再注射一次，分别于停药后第1、6、1l、16、21天共5个时间点进行采样。 利用已建立的猪组织中氟尼辛残留量的HPLC检测方法，测定该复方制剂中氟尼辛葡甲胺 在猪组织中的标示残留物——氟尼辛的残留量。停药后1天氟尼辛在猪各组织中的残留量 研究表明：停药后该复方制剂中氟尼辛在肌肉和皮脂中消除最快，注射部位和肾脏次 之，肝脏最慢，说明肝脏是氟尼辛的残留靶组织。氟尼辛在肌肉、皮脂、注射部位、肾脏、 肝脏组织中的残留量分别于停药后第6、6、11、11、16天时全部降至检测限以下。根据 结果显示氟尼辛在肝脏中的休药期约为7．51天；根据FDA对氟尼辛在猪肝脏中残留限量 (MRL)规定，将实测数据采用WTl．4计算软件拟合，结果显示氟尼辛在肝脏中的休药期约 为15．35天。鉴于以上结果，建议复方氟苯尼考注射液2 mg／kgb．w(以氟尼辛计)肌肉注 射，两次间隔48h给药，此复方中氟尼辛在猪的休药期为16天。 关键词：猪组织；氟尼辛；残留；消除；休药 DeterminationofFlunixinHPLC、LC．MS／MSanditsResidual inSwineTissues III by Depletion HPLCandLC·-M