双低甘蓝型油菜交种亲本指纹图谱及其在杂种纯度鉴定中的应用.pdfVIP

摘 要 ? i我国是皴界上第一个大巍积应用杂突油蔡的国家，波里马缨腿质雄性不穷(polCMS) 是我国洮菜杂穆饯势利用的主要CMS类型，但polCMS不寅系在低温袈一}譬F易出现微 照芘粉导致不育系自交产生不育的假杂秘；同时，在杂交釉尘产过程中，因收到、贮缄、 加工不憾可能会嚣致机槭混杂。豳此，简单、快速、有效地鉴定浊菜杂交神的纯度是当 6U油菜尘产上需要解决的问题。 与其它撩定方法相bb，DNA分子剜己鉴定植物品种纯度和真伪具有准确ur靠、一i 受环境影响和便于实现自动化等优点。，本研究采用RAPD分子标记技术，对39份双低 甘蓝型油菜杂交种亲本材料的指纹和1个杂交种纯度的浆定进行了研究。主要结粜为： 1． 140个随机引物对39份亲本材料进行RAPD扩增，选出40个能产生清晰多念 性主带的引物重复扩增，确定其中9个能稳定扩增出清晰多念性主带的引物为DNA指 纹图谱扩增引物。 2．9个引物扩增出匿复性好的多念性主带构建出39汾亲本的DNA指纹图谱。亲 本DNA指纹图谱可将27份材料一一区分开，另外12份材料合并为4级，每组内的材 料均为来源相同的姊妹系，指纹图谱鉴定结果与材料实际来源褶吻合。 初选岛4个引物S1334， 3．通过对一个杂交组合H9909两亲本的指纹图谱分析， UBC523，$374和S1365用于杂种纯度的鉴定。 均扩增出特辩带，引物$374和S1365能扩增父本特有的标记带。 4．以两亲本和手工杂种FJ为模板对上述4个引物褥一次进行RAPD扩增，S1334 扩增得到的蹲率标记带帮父本稼记带大小耩近，不易辫爨；引杨S374、S1365均镌 使F{产，圭父本韵特辫带。避一步确定了引物$374耦S1365霹蹋予杂种鉴定。 5引扬$374的RAPD标汜将祷鉴定100个雄株中翡5个不育单株标毫为骰杂种， 与罱阐育性溺查的结果完全～致。弓|杨S1365熬RAPD分桩结果显示，除上述5个不蠢 魄椿外，另铃两个哥旁单拣办为缎杂秘，可娆由於柬芘粉睾粉或枧撇混杂彝弓l起。 此外，本研究对弓l物的撵选、标汜繁粒参照对象、双引物臻网鉴定以及RAPD振过 在，羔产中戆应用等同题送行了讨论。 关键词：日·蕊型滴橐； 分享指纹； 杂种瘫度； 随机扫涵多态性DNA Abstract Chinaisthefirst to of intheworld．Pol country producehybridrapeseed practically CMS isthemain in CMSis tohavetrace system typehybrid production．However,poleasy when inlow andeffectivemethodisneededin pollensfloweringtemperature．A simple，fast seed todetect productionhybridity． DNA markersaremorerobustandeasiertobe automatedthanclassicmethods．Inthis of39 detectionofseed study,fingerprintsrapeseedmaterials(BrassicanapusL．)and purity