丝裂霉素c对瘢疙瘩成纤维细胞tgf-βsmads通路作用的初步探讨.pdf

㈣删ff『『『删㈣㈣删舢 Y1 90084谭。 目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………4 研究论文 丝裂霉素C对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF．p／smads 通路作用的初步探讨 前言…………………………………………………………………9 刖舌…………………………………………………………………y 材料与方法…………………………………………………………11 结果…………………………………………………………………19 附图…………………………………………………………………21 附表……………………………………………………………一…．25 讨论…………………………………………………………………27 结论…………………………………………………………………30 参考文献……………………………………………………………3l 综述 丝裂霉素C对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF—p／smads通路的 作用……………………………………………………………35 致谢……………………………………………………………………44 个人简历………………………………………………………………45 中文摘要 丝裂霉素C对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF—B／smads 通路作用的初步探讨 摘 要 增生性瘢痕是皮肤损伤后组织修复过程中出现的瘢痕组织过度增生 性病变，瘢痕增生挛缩影响患者的外观和功能，导致其生活质量下降。其 发病机制和病因目前尚未完全阐明，仍旧是整形科基础研究的热点之一。 很多实验己证明丝裂霉素C(mitomycinC，MMC)应用于瘢痕疙瘩治疗可 收到良好的效果。 转化生长因子p(Trallsfoming 与瘢痕疙瘩形成最为密切的细胞因子，研究表明，Smad家族作为细胞质 内TGF．p下游的信号转导因子，在瘢痕疙瘩的发生发展过程中起到关键 子机制的报道较少。本实验应用MTT法检测MMC对体外培养的瘢痕疙 瘩成纤维细胞增殖活性的影响，用W色stem 理论参考依据。 目的： 疗瘢痕增生的作用机制。 方法： 1应用手术中切取的瘢痕疙瘩组织作为体外原代和传代培养瘢痕疙瘩成 纤维细胞的组织来源，细胞培养成功后，取3．6代生长状态良好且处于对 数生长期的细胞用于实验。 2实验分组及干预：分为正常对照组、不同浓度MMC干预组。MMC干 处理细胞。正常对照组用lO％FBS的DⅧM培养液培养瘢痕疙瘩成纤 维细胞。 维细胞增殖活性的影响。 中文摘要 4采用RT．PCR方法，检测MMC对体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞 TGF．p1训[矾A表达的影响。 5采用Westem blot技术检测MMC作用下，体外培养瘢痕疙瘩成纤维细 影响。 检验，尸O．05为差异有统计学意义。 结果： 1体外瘢痕疙瘩成纤维细胞的形态学观察 体外瘢痕疙瘩成纤维细胞原代培养成功后，培养细胞呈梭形，细胞 体积较大，胞质向外伸出2．3个长短不同的伪足，有一个较大的卵圆形 核，细胞界限清楚，开始单个细胞一般铺展很开，细胞间排列疏松，有 较大的细胞间隙，随后细胞增多，则细胞相互平行排列，成群细胞呈漩 涡状或放射行走。 2MMC对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖活性的影响 别干预增生性瘢痕成纤维细胞24h，48 即对细胞生长有明显的抑制作用，这种抑制作用在200p咖l时达到最大， 显示出明显的剂量一效应依赖关系。在24h、48h、72h这3个时间段内， 随着培养时间的增加，细胞生长抑制率呈现上升趋势，作用48h，72h， 显著。