氯丙嗪单独及与铂联合应用对人宫颈癌hela细胞生长影响的研究.pdfVIP

中文摘要 I a 氯丙嗪单独及与顺铂联合应用对人宫颈癌He 细胞生长影响的研究 摘 要 Hela细胞体外生长的抑制作用及其相关机制，同时观察氯 外作用。从而探讨其抗癌疗效，评价氯丙嗪治疗宫颈癌的安 全性、可行性，以期对药物治疗宫颈癌提供新思路、新方法。 方法：选取人宫颈癌Hela细胞为研究对象。实验分三 组，即氯丙嗪、顺铂、氯丙嗪与顺铂联合组。1采用四甲基 colorimetric 偶氮唑蓝(tetrzolium-based assay，MTT)比色 细胞增殖的影响，测定吸光度(OD)值。不同浓度的氯丙 嗪作用Hela细胞48h后，流式细胞仪检测凋亡细胞百分率、 细胞周期的改变以及凋亡基因Bax、Bcl．2表达量的改变： DNA凝胶电泳分析DNA片段的变化。2不同浓度各组药物 响，测定OD值；HE染色分析细胞的形态学变化：链亲和 素免疫组化法(S-P法)检测细胞p53的表达量变化。 结果：1MTT结果显示：一定浓度的氯丙嗪在一定范围 内能明显抑制Hela细胞的增殖，且随氯丙嗪浓度的升高和 作用时间的延长，抑制作用明显升高，呈现出明显的浓度依 赖性和时间依赖性。分别用氯丙嗪、顺铂及联合用药处理细 中文摘要 t．t mol／L、0．5 差异有非常显著性(P0．01)：顺铂在浓度为O．2 1．1 pmol／L、1．0 ta mol／L和2．0 mol／L时对Hela细胞的抑制率 70．42％、76．15％，明显高于单纯应用相同浓度的顺铂组。 2流式细胞术结果分析：流式细胞仪检测Hela细胞周期 多，S期和G2／M期细胞则逐渐减少，即氯丙嗪可阻滞Hela 细胞周期于G．期，该作用呈剂量一效应依赖关系；10’1、10 二倍体凋亡峰，依氯丙嗪浓度增大而逐渐增高，凋亡百分率 分别为：5．03％、9．35％、23．85％；流式细胞仪间接分析细 度增大而逐渐增大，Bcl一2的荧光指数FI值随处理浓度增大 而逐渐减小，对于每一种蛋白，其实验组与对照组的FI值， 01)。 均具有显著性差异(P0 3 阶梯状排列条带(DNAladder)，而对照组则没有出现。 4HE染色结果分析：细胞核染蓝紫，胞浆染粉红色。随 药物浓度增大，Hela细胞由不规则形渐变圆，出现核固缩、 浓聚、断裂后形成的凋亡细胞，呈致密紫蓝色大小不等的颗 中文摘要 Ia 粒。顺铂组，当浓度为O．5mol／L时，可见凋亡细胞：而两 1．t 药联合组，当顺铂浓度为0r2mol／L时，便出现上述表现。 变化的结果：P53蛋白主要表达于细胞核内。氯丙嗪组，p53 较，差异具有显著性(P0．01)。顺铂组，p53蛋白的表达进 1．1 一步上升，当浓度为O．5mol／L时，光密度值为 两药联合组p53蛋白的表达明显增强，OD值升高明显，即 II 最低浓度(10’7mol／L)氯丙嗪与最低浓度(O．2mol／L)顺 铂联合作用后，OD值达到0．2560士0．0305，与对照组相比， 具有极其显著性差异(P0．01)。与对应浓度顺铂处理Hela 细胞的p53蛋白染色阳性细胞光密度值比较，存在统计学差 异(P0．OD。 结论：1在一定剂量和时间范围内