酶工程生物技术分析报告.pptVIP

酶工程 李福利 山东大学微生物技术国家重点实验室 一 什么是酶？ 二 酶催化特性 高效率 比非催化高108－1020倍 比非酶催化高107－1013倍 高度专一性 反应条件温和 酶催化是可调控的 三 酶的化学本质 Enzyme Proteins Ribozyme RNAs 四 酶的组成 简单酶 酶 结合酶 辅酶 Coenzyme 辅因子 辅基 Prosthetic group Table 2 Holoenzyme Apoenzyme Cofactor 五 酶的命名与分类 原则： 根据酶所用的底物来命名 Ribonuclease Protease 根据所催化的反应来命名 Dehydrogenase Phosphotransferase Aminotransferase 上述两个原则结合 上述原则再加上酶的来源 牛胰核糖核酸酶 （一）国际系统分类法 氧化还原酶类 Oxidoreductases 转移酶类 Transgerases 水解酶类 Hydrolases 裂合酶类 Lyases 异构酶类 Isomerases 合成酶类 Synthetases Synthases （二）系统命名法 ATP: Creatine Phosphotransferase ATP: 肌酸 磷酰基转移酶 Glutamate: Pyruvate aminotransferase 谷氨酸： 丙酮酸 GPT 氨基转移酶 单体酶 Monomeric enzymes 寡聚酶 Oligomericenzymes 多酶体系 Multienzyme systems 酶工程 酶工程 酶工程即利用酶的催化作用，在一定的生物反应器中，将相应的原料转化成所需的产品。酶工程是现代酶学理论与化工技术的交叉技术，它的应用主要集中于食品工业、轻工业和医药工业等领域。 酶工程的应用范围 （1）对生物宝库中存在天然酶的开发和生产； （2）自然酶的分离纯化及鉴定技术； （3）酶的固定化技术（酶和细胞固定化）； （4）酶反应器的研制和应用； （5）与其他生物技术领域的交叉和渗透。 其中固定化酶技术是酶工程的核心。实际上有了酶的固定化技术，酶在工业生产中的利用价值才真正得以体现。?  尽管人类19世纪前后才建立起酶的概念，但酶的催化作用却很早就为人们的生活所利用。比如： 1 在人类游牧生活时期，就已会利用动物的胃液来凝固牛乳 ； 2 人类在4000多年前就已掌握的酿酒和制酱技术其实也是酶作用的结果。 放线菌 1987年以后，Bucher发现酶的细胞外作用现象，从而导致了酶的商品化生产。  霉菌 最初的商品酶制剂主要以动植物为原料提取，如从牛胃中提取凝乳酶、从胰脏中提取胰酶、从血液中提取凝血酶、从植物材料中提取淀粉酶等。 之后，Takamine利用霉菌来生产淀粉酶使得酶制剂工业取得突破，其方法至今仍被采用 第二次世界大战以后，随着微生物培养技术、发酵工业和设备的渐渐完善，利用微生物来获得商品化酶制剂已形成规模化产业，并开辟了广阔的市场。 微生物酶的开发 一、应用微生物来开发酶的优点： 1 微生物生长繁殖快，生活周期短。因此，用微生物来生产酶产品，生产能力（发酵）几乎可以不受限制地扩大，能够满足迅速扩张的市场需求。 2 微生物种类繁多，它们散布于整个地球的各个角落，而且在不同的环境下生存的微生物都有其完全不同的代谢方式，能分解利用不同的底物。 3 这一特征就为微生物酶品种的多样性提供了物质基础。 微生物酶的开发 一、应用微生物来开发酶的优点： 4 特别是当基因工程介入时，动植物细胞中存在地酶，几乎都能够利用微生物细胞获得。 因此，有计划和仔细地筛选微生物菌种，通常可以获得能够生产几乎任何一种酶的适当细胞。 微生物酶开发的一般程序 一 样品的采集 采样的目的、采样地点、采样方法及采样的数量。 微生物酶开发的一般程序 二 菌种的分离 培养基的确定、培养条件的确定。 微生物酶开发的一般程序 三 菌种的初筛 1 用简单的定性反应进行初筛； 2 在最初分离阶段就给予特殊的培养基或培养条件，进而让目的菌株得以繁殖，尽可能地把只成为目的菌的菌株或只将其最适菌株的一株纯化分离。 微生物酶开发的一般程序 四 菌种的复筛 初筛之后，还要进行复筛。复筛的目的是在初筛的基础上，筛选产酶量高、性能更符合生产要求的菌种。复筛。 酶活的测定方法的建立尤其重要。 微生物酶开发的一般程序 五 对复筛获得菌株的要求 1 不是致病菌； 2 菌株不易变易和退化； 3 不易感染噬菌体； 4 微生物产酶量高； 5 酶的性质符合应用的需要，而且最好是胞外酶； 6