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胆脂瘤型中耳炎细菌检测及耐药性分析 　　[摘要] 目的 探讨胆脂瘤型中耳炎患者细菌感染的菌种分布及耐药性发生情况，为临床合理使用抗生素对抗胆脂瘤型中耳炎感染提供参考。方法 选择74例到该院就诊的胆脂瘤型中耳炎患者耳部流脓标本进行培养，获得患者致病菌组成分布。对获得的菌株进一步进行生物膜半定量检测和药敏试验检测，分析其耐药性。结果 所有观察对象中所获得的胆脂瘤型中耳炎致病菌从高到低分布依次为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌，有生物膜的细菌普遍比无生物膜的细菌耐药率高。结论 胆脂瘤型中耳炎致病菌发生率高低可因“三间”不同而有差异，并且有生物膜的细菌比无生物膜的细菌耐药率高，值得临床注意。 　　[关键词] 胆脂瘤型中耳炎；细菌检测；细菌生物膜；耐药性 　　[中图分类号] R37 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2013）04（b）-0012-02 　　在胆脂瘤型中耳炎的治疗过程中，除了手术治疗外，也必须针对其化脓进行常规的抗菌抗炎治疗，但是往往效果不佳，容易发生细菌对抗生素耐药，发生反复现象。该文旨在从胆脂瘤型中耳炎细菌的检测和其常见的耐药现象入手，研究胆脂瘤型中耳炎的流脓症状和胆脂瘤型中耳炎耐药可能机制，对临床用药做出参考。现回顾性分析2010年6月―2012年5月该院收治的74例胆脂瘤型中耳炎患者耳部流脓标本的临床资料，将结果报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择74例到该院进行检查并诊断明确的胆脂瘤型慢性化脓性中耳炎住院患者，其中男性病例34例，女性病例40例，年龄分布在23～65岁间，平均年龄是（45.3±2.1）岁。所有患者中单发一侧耳朵病例56例，双侧耳朵发病18例，病程为3个月～37年，平均病程时间为（159.7±7.8）个月。所有患者均发现患侧耳部流奇臭脓液，45例患者伴随发热症状，体温测定值分布在38.6～40.1 ℃，未见昏迷休克症状。进一步检查可见所有患者均出现不同程度听力下降情况，其中53例患者单纯气导阈值增高，21例患者出现骨导、气导阈值均增高现象。在基础疾病检查中，74例患者有呼吸道疾病者38例，循环系统疾病者21例，神经功能障碍者8例，未见严重脑脓肿病例。 　　1.2 方法 　　①菌株采集：所有74例患者均在进行药物治疗前或者在停药48 h后开始进行病原菌的采集，在采集过程中先对患者外耳道常规消毒，后用无菌的棉拭子采取患者耳部分泌物，采集过程中注意无菌操作原则，避免杂菌污染。采集完成后尽快送检，对于未能及时送检的标本，保存在4 ℃低温环境下，但是对于需进行厌氧菌培养的菌株，则必须马上送检。②细菌鉴定：将采集到的菌株标本分别在血琼脂培养基、苯唑、麦康凯琼脂培养基等培养基上进行需氧菌的培养，培养时间通常为1 d。在厌氧菌培养过程中，以巧克力色血平板作为培养基，在二氧化碳培养箱制作的无氧环境进行培养，培养时间一般为2 d。如果标本两种培养方式均不能获得菌株，则怀疑可能有真菌感染情况，进行真菌培养鉴定。菌株培养完成后，用HX-21全自动基本型细菌鉴定药敏分析仪鉴定标本菌落种类。③生物膜半定量测定：菌落在刚果红培养基完成培养后转移到血平板，在转移到适合浓度的TSB 0.25%Glu、TSB2%Alc、TSB4%NaCl上培养，最后使用96孔板半定量生物膜，记录所获得的比色数值。④药敏检测：细菌药敏性检测采用琼脂扩散法，用青霉素、头孢他啶、红霉素等抗菌药敏试纸检测。 　　1.3 统计方法 　　统计学分析采用SPSS 10.0统计软件进行统计学计算，计数资料进行χ2检验。 　　2 结果 　　2.1 细菌鉴定结果 　　所有74例患者标本中培养出细菌的送检标本为51例，其中需氧菌株被培养出67株，未发现厌氧菌株，真菌培养数量为1株。68株培养出来的菌株中革兰氏阳性菌株数量为41株，革兰氏阴性菌株数量为26株，主要的菌株分布为金黄色葡萄球菌25株，表皮葡萄球菌8株，铜绿假单胞菌19株，由高到低排列分别为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌。 　　2.2 生物膜半定量测定结果 　　3种主要菌株平均光密度OD测得值从高到低依次为：铜绿假单胞菌，金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，具体数值为0.5，0.25，0.1。 　　2.3 药敏检测结果 　　对于铜绿假单胞菌来说，检测结果发现普遍的有生物膜的比没有生物膜的对先锋霉素V、阿米卡星、庆大霉素耐药情形严重，两者相比，差异有统计学意义（P0.05）。 　　对于葡萄球菌来说，产生物膜的葡萄球菌总体上也比未产生物膜的葡萄球菌耐药性强，并且二者之间的差异有统计学意义（P0.05），见表1。 　　3 讨论 　　胆脂瘤型中耳炎是慢性化脓性中耳炎中最严重的一种，并且极易造成并发症损害。胆脂