大豆异黄酮含量的测定.docVIP

前 言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家粮食局提出。 本标准由。 本标准起草单位：中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、。 本标准主要起草人：本标准首次发布。 大豆异黄酮含量的测定高效液相色谱法范围 本标准规定了大豆大豆异黄酮含量的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于大豆中大豆异黄酮含量的测定。 方法最低检限为mg/kg 。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682-1992，neq ISO 3696:1987）原理 粉碎后用超声提取，液相色谱 试剂与材料4.1乙腈色谱纯4.2甲醇。 4.3乙酸。 4.4 90%甲醇醇醇醇醇醇乙酸乙腈溶液乙腈大豆甙(Daidzin)，纯度≥9%。 4.10染料木甙(Genistin)纯度≥99%4.11大豆黄素(Daidzein)纯度≥98%4.12染料木素(Genistein)纯度≥9%。 4.13黄豆黄素（Glycitin）：纯度≥9%。 4.14黄豆黄素甙元(Glycitein)： 纯度≥9%。 4.15标准标准称取大豆甙染料木甙大豆黄素染料木素 60％醇(V/V)标准10 mL容量瓶中，用60％醇(V/V), 配制成浓度为50 μg/mL的中间标准溶液，0 ℃～4 ℃冷藏避光保存，有效期3个月。 4.15.3 混合标准工作溶液：根据需要用10%甲醇(V/V) 0℃～4℃冷藏避光保存，有效期为一周。 仪器 5.1 高效液相色谱仪5.2 电子天平0.01 mg， 0.01 g。 5.3 旋转蒸发器。 5.4 超声波发生器瓶0 mL。 6 试样制备与保存 6.1 试样制备 取有代表性样品约500 g，用粉碎机粉碎，过20 目筛，测定步骤 .1试样处理 置于0 mL具塞三角瓶中，过0.45 μm 滤膜，高效液相色谱仪测定。.2 测定 .2.1 液相色谱条件 柱（250mm×4.6mm，5μm）流动相：0.1%乙酸水溶液和乙酸乙腈溶液按以下梯度表柱温：40℃波长：260 nm时间min 乙酸水溶液0.1% 乙酸乙腈溶液 0 90 10 12.5 70 30 17.5 60 40 18.5 0 100 21.0 0 100 22.5 90 10 26.0 90 10 7.2.2 测定 大豆异黄酮大豆异黄酮大豆甙染料木甙大豆黄素染料木素大豆异黄酮 ……………………………………………（1） 式中: X——试样中大豆异黄酮A——样液中大豆异黄酮C—— 标准工作液中大豆异黄酮V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）As——标准工作液中大豆异黄酮M——最终样液所代表的试样质量，单位为克（g）。 9 测定低限和回收率 9.1测定低限 本方法的测定低限为2.5 mg/kg。 9.2回收率 在不同的基质中，大豆异黄酮大豆甙染料木甙大豆黄素染料木素 （资料性附录） 标准品相色谱图 图A．1 大豆异黄酮（大豆甙染料木甙大豆黄素染料木素 SN/T ××××—×××× SN/T ××××—×××× 1 GB/T×××××.××—×××× GB/T×××××.××—×××× 4 I 2 3 ICS 中华人民共和国国家标准 GB/T×××××. ××—×××× 大豆异黄酮含量的测定 -高效液相色谱法 Determination of soybean isoflavone content by HPLC （征求意见稿） （本稿完成日期：2008年9月） ××××-××-××发布 ××××-××-××实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局发布 发布