实践八号卫星搭载八个苜蓿品种的生理特性与RAPD分析.pdfVIP

苜蓿基础研究 实践八号卫星搭载八个苜蓿品种的生理特性与RAPD分析 韩微波1，杜连莹1．一，张月学1，唐凤兰1，刘杰淋1刘风歧1 (1．黑龙江省农业科学院草业研究所黑龙江150086；2．哈尔滨师范大学黑龙江150025) 摘要本研究利用实践八号(SJ．8)返回式卫星搭栽八个苜蓿品种，以未经搭栽的种子作为对 照，研究空间环境对苜蓿SPl代生理特性和RAPD标记谱带变化的影响。试验结果表明，经实践八号 卫星搭栽后。相比对照。八个苜蓿品种的过氧化氢酶(POD)活性增强，超氧物歧化酶(SOD)活性 降低，可溶性蛋白含量升高。RAPD标记分析结果表明，实践八号卫星搭栽引起了八个苜蓿品种SPl 肇东苜蓿多态性位点频率最高，为19．23％，BeZa87最低，为7．04％。 关键词 实践八号 苜蓿生理特性RAPD 空间环境主要包括了微重力、太空辐射等因素，被广泛用于农作物诱变育种。自1987年以来，我 国利用返回式卫星、神舟飞船和高空气球先后进行了23次作物种子等生物材料的空间搭载试验，在水 稻、小麦、棉花、青椒、番茄、芝麻、牧草等作物上育成和审定了40多个高产、优质、多抗的农作物 新品种和许多的优良变异材料。2006年，我国发射了第一颗育种专用卫星——实践八号，装载了包括 152种植物、微生物和动物等2020份生物品种材料，并搭载了空间环境探测与机理研究装置。 苜蓿是世界上种植面积最为广泛的豆科牧草，被誉为“牧草王后”，它产量高、品质好、适应性广， 是现代牧草产业重点发展的牧草之一。许多研究者利用我国不同年份发射的返回式卫星搭载苜蓿，围 绕农艺学、细胞学和基因组DNA变异开展了相关研究。本研究利用我国发射的实践八号育种专用卫星 搭载了八个苜蓿品种，研究空间环境对苜蓿SPl代生理特性的影响，用RAPD标记方法研究SPl代基 因组DNA损伤特性与变异，比较不同基因型苜蓿对空间环境响应的差异，探索空间环境诱变紫花苜蓿 的特异性及育种前景。 1材料与方法 1．1材料 Pleven6是从保加利亚引进的紫花苜蓿品种；肇东苜蓿为黑龙江省紫花苜蓿地方品种；龙牧801和龙牧 803是黑龙江省畜研所育成的紫花苜蓿品种；草原I号是内蒙古农业大学育成的紫花苜蓿品种。 1．2方法 1．2．1种子处理 每个苜蓿品种随机挑选3000粒种子，用白色棉布袋包装注明，搭载“实践八号育种卫星(用 射中心用长征二号丙运载火箭成功地将“实践八号’’卫星送入近地点187km、远地点463km的近地轨 @中国謇牧业协会簟业分会261 2011中国苜蓿行业发展大会 道，在轨运行15天后，返回舱于9月24日上午10时43分在四川遂宁成功返回。 1．2．2生理指标测定 法；可溶性蛋白含量测定采用考马斯亮蓝(G．250)法。 1．2．3 RAPD分子标记方法 采用改进的CTAB法提取苜蓿基因组DNA。 Taq酶，1．5U；模版DNA，100rig。PCR扩增仪(Biometra 用36个引物，均购自宝生物工程(大连)有限公司，每个引物重复实验两次。PCR扩增产物采用1．O％ 琼脂糖凝胶恒功率电泳分离，溴化乙锭染色后于紫外灯下观测并照相。 计算公式如下：多态性位点频率(％)=出现的多态性位点数／扩增出的总位点数100 2结果与分析 2．1 实践八号卫星搭栽苜蓿SPl代生理特性分析 由表1可以看出，经实践八号卫星搭载后，8个苜蓿品种的POD值均大于对照，POD值增加幅度 分别增加了17．04％、15．53％、13．79％、13．49％、7．75％、7．53％、6．12％和3．70％。 表l 实践八号卫星搭载后8个苜蓿品种SPl代POD、SOD和可溶性蛋白值 of alfalfa carriedSJ-8satellite Table1 POD、SODandsoluble eultivarsby proteineight 竺兰竺竺 燮呈 竺兰燮：三： !兰兰要鲎芝；竺兰 WL2