人剪切修复基因XPD对肝癌细胞生长及ERG基因的影响.pdfVIP

天津医药 2013年 1月第 4l卷 第 1期 doi：lO．3969／j．issn．0253-9896．2013．01．002 人剪切修复基因XPD对肝癌细胞生长及 ERG基因的影响士 邹颖颖 张吉翔 摘【要】 目的 探讨人剪切修复基因XPD转染人肝癌细胞SMMC一7721后对细胞 自身生长及癌基因ERG 表达的影响。方法 将XPD基因通过Lipofectamine~2000转染人人肝癌细胞 SMMC一7721。实验分为4组 ，分别为 重组质粒转染细胞SMMC一7721一pEGFP—N2一XPD组 (XPD组)、空载质粒转染细胞SMMC一7721一pEGFP—N2组 (N2组)、脂质体转染细胞SMMC一7721组 (脂质体组)、肝癌细胞 SMMC一7721无转染空白对照组(空白对照组)。 分别用逆转录聚合酶链反应 (RT—PCR)和Westernblot法检测各组细胞 中XPD、ERG的mRNA和蛋 白质 的表达 量，用四甲基偶氮唑盐比色法(M，ITr)检测各组细胞的增殖活力及流式细胞仪检测各组细胞的凋亡情况。结果 与 其他 3组 比较 ，XPD组中的ERGmRNA及蛋 白表达量显著降低 ，而 XPDmRNA及蛋 白表达量明显升高 (P 0．01)。转染了XPD的肝癌细胞SMMC一7721，其细胞增殖活性(O．455+0．009)显著降低 ，细胞凋亡率(42．06+0．01)％ 明显升高(P0．001)。结论 XPD基因可以抑制癌基因ERG的表达，明显降低肝癌细胞 的增殖活力并提高肝癌 细胞 的凋亡率。 【关键词】肝肿瘤；细胞系，肿瘤；质粒；逆转录聚合酶链反应；印迹法，蛋白质；细胞凋亡；XPD基因；ERG基因 TheRoleofXPD inHepatomaCelIGrowthandERG Gene ZOUYingying，ZHANGJixiang DepartmentofGastroenterology，TheSecondAffiliatedHaspitalofMedicalco ofNanchang University，Nanchang330006，China A【bstract] Objective ToinvestigateeffectsoftransfectedXPDgeneonthegrowthofhepatomacellSMMC-7721 and theexpressionofERG gene．Methods TheXPD genewastransfected intoSMMC-7721with Lipofeetamine2000． TherewerefourgroupsinthisstudyincludingSMMC-7721一pEGFP-N2一XPDgroup (XPD)，SMMC一7721一pEGFP—N2 group (N2)，Lipofeetaminegroup (Lip)andblankcontrolgroup．ReversetranscriptasePCRandWesternblotwereusedto measuretheexpressionsofXPD andERG mRNA and proteinlevels，respectively．Thecellproliferationwasassessedby MTrassayand thecellapoptosiswasexaminedbyflow cytometry．Results Compared with N2group，Lipgroupand blankcontrolgroup，theexpressionofERGmRNAandproteinsignificantlydecreasedinXPDgroup (尸O．01)，andthe expressionofXPDmRNAandproteinwereenhancedsignificantlyinXPDgroup 0．01)．Theproliferatio