薄层层析指导下的嗜碱放线菌菌株YIMGQ—14次生代谢产物研究.pdfVIP

43卷 4期 微 生 物 学 报 Vo1．43 No．4 2003年 8月 Acta Microbiologica Sinica August 2003 薄层层析指导下的嗜碱放线菌菌株YIMGQ．14 次生代谢产物研究 李铭月4 Groth Ingrid 李一青 Sattler Isabel 文孟良卜 ( 云南大学教育部微生物资源开放研究重点实验室 昆明 650091) ( Hans．Kn~l1．Institute for Natural Product Research，Beutenbergstra~e 1la，D．07745 Jena，Germany) 摘 要：在微生物资源的开发研究过程中，利用TLC方法，配合TLC数据库的检索，对嗜碱放 线菌菌株 YIMGQ14的次生代谢产物进行了研究。并从中分离纯化出两个具有生物活性的专 利化合物“Umycin C”和“Umycin B”。结果证明：相对于常规的生物活性筛选，TIE法在微生物 次生代谢产物研究中具有快速、简便、经济的特点，适合于小量常规筛选的目的。通过进一步 对相关的TLC数据库进行构建和补充，将能极大地改善该方法的使用效率。 关键词：薄层层析(TLC)，次生代谢产物，放线菌 中图分类号：Q939．13 文献标识码：A 文章编号：0001．6209(2003)04．0481．06 自从20世纪40年代Waksman从放线菌中发现链霉素以来，放线菌生物学的研究及 抗生素的开发随之蓬勃发展起来，并在20世纪50～60年代达到了高潮，为人类的医疗保 健事业作出了巨大的贡献…。 现在很多专家相信，并非存在于自然界的所有类型的抗生素均被发现，如果我们研究 过去未曾研究过的异常生活环境中的稀有微生物，找到新的有用化学结构的机会将是较 大的。考虑到去重复问题，很有必要考察不同种类的放线菌，特别是尚未详细研究过的亚 群(属)放线菌，稀有或难分离及培养的放线菌菌株 。 。 自从Fleming爵士在 1928年发现了青霉素以来，在接下来的几十年里，许多抗生素， 如：大环内酯类抗生素、四环素类抗生素、多稀类抗生素、氨莎环类抗生素以及氨基糖甙类 抗生素主要是通过经典的琼脂扩散法(Agar diffusion assay)被发现。该方法在20世纪60～ 70年代被“酶和受体结合分析”(Enzyme and receptor binding assay)所取代。之后的十几年 里，分子和细胞生物学的发展产生了现在使用的高通量筛选手段。在以上各种方法中，经 典的琼脂扩散法出现的问题越来越多，生物筛选过程中大量的抗生素被重复发现。另外， 琼脂扩散法除了可以用来进行抗感染筛选外，还不能扩展到其它的生物测定领域。“酶和 受体结合分析”也有其不足之处，比如因为假阳性结果而浪费大量的样品。至于现在被许 多大型制药企业所采用的高通量筛选，其实并不适合于少量的样品筛选。而且，用高通量 基金项目：国家科技部重点项目(2OOlccc0o6oo)；云南省自然科学基金(2001C003R) 通讯作者。Tel：86·871·5032170；Fax：86·871·5173878；E·mail：mlwen@ynu．edu．cn 作者简介：李铭刚 (1973一)，男，浙江省海盐县人，助理研究员，博士，主要从事微生物次生代谢产物研究。 E·mail：mgli727@yahoo．corn 收稿日期：2002．11．o4．修回日期：2003．01．o9 微 生 物 学 报 43卷 法来进行筛选也并不是一个经济的方法。一般说来，用高通量来筛选每个样品的成本为 1美元。如果是自动平行分析天然来源的粗提物，还会更加昂贵 。 面对避免重复问题和避免纯化合物假阳性问题，在20世纪80年代，Zahner和化学家 Keller-Sehierlein及Zeeck根据不断增长的薄层层析(Thin layer chromatography，TLC)知识和 染色剂知识，提出了一个新的筛选策略，它就是后来