细菌培养及检测课件.pptVIP

细菌及其培养和检测的学习汇报 目录 第一讲微生物细菌学 第二讲细菌培养 第三讲大肠杆菌 第四讲金黄色葡萄球菌 第五讲真菌学及其检测 第六讲微生物学及其检测 第一讲 微生物细菌学 球菌形态 细菌的结构及功能 基本结构由外到内细菌的依次是 细胞壁、细胞膜、细胞浆 和核质 。 特殊结构有 荚膜、鞭毛、菌毛和芽孢。 其中能维持细菌的固有形态的结构是 细胞壁， 控制遗传性状的是 核质， 与细菌的毒力有关的结构是 荚膜和菌毛， 抵抗力强 的是 芽孢， 决定细菌有无运动性的结构是 鞭毛。 芽孢 菌体 细菌的生理 ℃ 第二讲 细菌培养 一、细菌培养的实验原理 二、目的要求 大肠杆菌的生长状态 三、材料用具 四、细菌培养的方法和步骤 （五）、培养 （四）、接种 （三）、搁置斜面 （二）、灭菌 （一）、培养基的配置 （一）、培养基的配置 打开高压蒸汽灭菌锅，将里面的灭菌桶取出，向锅内加水（最好用开水），水面与底架平齐为宜。 排出锅内的冷空气。接通电源，当压力上升到49KPa时，打开排气阀放气，当压力降到0是时，关闭排气阀。重复上述放气过程一次，以彻底排出锅内的冷空气。 当锅内的压力上升到98KPa时，控制火力大小，使压力维持在98KPa左右20min。切断电源。 将扎好的试管管口向上竖放在灭菌桶内，再将灭菌桶放回灭菌锅。注意：灭菌桶内的物品不能放得太挤，否则影响灭菌效果。 加盖，并将排气软管插入灭菌桶的排气槽内。以两两对称的方式，同时旋紧相对的两个紧固螺栓，以防漏气。 当压力降至0以后，打开排气阀，10min以后，旋松紧固螺栓，取出试管。最后。将灭菌锅里的水排放干净。 （二）、灭菌 （三）、搁置斜面 （四）、接种 1 3 2 4 5 用肥皂将双手洗净，擦干，再用酒精（75％）棉球擦拭双手。 当手上的酒精挥发完毕以后，点燃酒精灯。注意：一定要等手上的酒精挥发完毕后，在点燃酒精灯，否则，容易将手烧伤。 接种 注意：整个实验操作过程都要小心谨慎，不要碰翻酒精灯，以免烧伤。 （1）用左手大拇指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种和斜面试管，右手拧松棉塞，不取下。 （2）右手拿接种环，在火焰上烧灼灭菌，特别是箍处。 （3）在火焰边取下两个棉塞，不能放下;烧灼管口一周。 （4）将接种环伸入试管内，冷却后，轻轻挑取少量菌体，立即将接种环抽出。 （5）在火焰旁将沾有菌种的接种环迅速伸到斜面培养基的底部，由里向外画蛇形细线。 （6）抽出接种环后。烧管口，塞棉塞，接种环灭菌。 熄灭酒精灯。实验后的带菌培养基，如果用的是致病菌，必须经高压蒸汽灭菌后方可倒掉；如果是非致病菌，也要经过加热后再倒掉。 接种完毕，将所接菌种、接种日期、接种者姓名填写在标签上。 （五）、培养 五、结论 观察斜面培养基上的细菌生长状况如何？ 细菌在液体培养基中生长后，常出现混浊，沉淀或形成菌膜。 细菌接种在固体培养基上，经过一定时间的培养后，表面出现肉眼可见的单个细胞集团，称为菌落。 液体培养基 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 固体培养基：菌落、菌苔 六、讨论 问题 答案 1.在高压灭菌开始之前，为什么要排尽灭菌锅内的冷空气？ 在高压锅灭菌以前，如果国内的冷空气没排尽，当压力上升到98KPa，锅内的温度就不会达到应有的温度，导致灭菌不彻底。 2.灭菌完毕以后，如果压力未降到0就打开排气阀，会出现什么现象？为什么？ 如果压力未降到0就打开排气阀，试管内的培养基就会冲出管口，这是因为高压蒸汽灭菌锅内外的压力不平衡所致。 3.这种操作为什么一定要在火焰旁进行？ 空气中存在有大量的微生物，而接种灯得火焰旁能形成一个无菌区域，在这里操作，可以避免杂菌污染。 第三讲 大肠杆菌 大肠杆菌 1、培养：在LB液体培养基上扩大培养 2、分离： 灭菌 ↓ 倒平板 ↓ 培养 ↓ 划线分离 LB液体和固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌 将固体培养基倒入4个灭菌后的培养皿中，制备平面培养基 在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养12h 平板划线法 培养皿倒置，37℃恒温培养12~24小时 大肠杆菌检测方法和步骤 方法：用平板涂布法将样品稀释后（每个水样做3个浓度）涂布到伊红美蓝培养基后，待长出菌落，观察符合特征的群落，计算菌落数目，从而求出总数目。 培养基成分及其配置 1、成分：蛋白胨10g、乳糖 10g 、磷酸氢二钾 2g 、琼脂 20~30g、蒸馏水1000ml 、2%伊红水溶液 20ml、0.5 %美蓝水溶液 13ml 2、配置方法：先将琼脂加至900ml蒸馏水，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨，混匀使之溶解，再以蒸馏水补足至1000ml，调整PH为7.2~7.4。趁热用脱脂棉或绒布过滤，再加入乳糖，混匀后定量分装