小麦叶片中Na,K提取方法的比较.pdfVIP

幻一 2- 。 ，’叶广’每 、 ， 植物生理学通讯 咖 ＆唧删删棚晚档 1999，31(I)：50-52 小麦叶片中Na、K提取方法的比较 壬宝山’赵可夫(山东师范大学逆境植物研究所，济南2s0l{) ● — — 一 — — — — 一 5争 、fD J Comparison of Extractive M ethods of Na and K in W heat Leaves WANG Bac~Shan，ZHAO Ke Fu ( Pbxa ， 卿由叼 Te~ erdf柚 却 ，J材踊 25001{) 在植物抗盐和营养生理研究中，经常需 要测定组织中 Na、K等无机离子 。无机离子 的测定通常使用原子吸收光谱法。但是，如何 从植物组织 中提取 Na、K等离子，不同的研 究者使用的方法不同，总计不下十几种。Ⅷ 。 这些方法所用的提取介质不同，提取时间各 异，是否会导致实验结果不同，尚无人研究。 另一方面这些方法操作的难易程度相差悬 殊，时间从几分钟到几天，实验费用不等。因 此，能否找出一种简便快速、准确可靠且又经 济的方法是很值得研究的。奉文采用同一种 组织材料、相同仪器对 目前普遍采用的 8种 方法中的提取介质和提取时间(适当缩短或 延长)进行了比较。 材料与方法 1 化学试剂和檀物材料 实验所用的化学试剂均为分析纯。材料 为小麦(n 妇m∞d扫m)品种济南 l3号。种 子经 0．1 HgClz消毒 5 rain后，自来米冲洗 数次 ，然后在 25C培养箱 中催芽 24 h，挑选 露 白一致的种子播于装有洗净砂子 的盆钵 中。每天每盆浇 150 ml】／2 H~gland营养液 (pH 5．7)。当第三叶刚出现时(吸胀后第 10 天)，取基部完全伸展的第 1叶片迅速用无离 子水冲洗 3次，吸干 ，称重，烘干或冷冻，或直 接用于提取。幼苗生长的温度为白天 25士 2℃，晚上 l8士2~C，光周期为 12 h照光／t2 h 黑暗，光照度约为 8 000 ix。 2 实验方法 供 比较的 8种提取方法如下 (1)精确称取一定量烘至恒重的干材料 粉末 ，于 550C马福炉中灰化一定时间，冷却 · 50· 至室温，用步许浓 HNO．~硝化，用无离子水定 容【 。空白对照为加等量浓 HNOs的无离子 水。 (2)精确称取一定量烘至恒重的干材料 粉末，加定量无离子水于 lOOC沸水中煮一 定时间，冷却后定容，5 000 g离心 15 min，上 清液用于离子测定 ]。空白对照为无离子水。 (3)精确称取一定量烘 至恒重的干材料 粉末，加入一定量硝 化液 (1 ml 60 三氯乙 酸，5ml浓硝酸和 0．5 ml浓硫酸混合而成)， 于 90C恒温水浴中提取一定时间嘲。空白对 照为加入等量消化液的无离子水 。 (4)精确称取一定量烘 至恒重的干材料 粉末，加入一定量 0．5 HNOa溶液，于 90℃ 恒温水浴中提取二定时问，拎却后，5 000 g 离心 15 ndrl，上清液用于离子测定嘲。空白对 照为加入等量 0．5 HNO．~的无离子米 。 (5)精确称取一定量烘至恒重的干材料 粉末，加入一定量高氯酸与浓硝酸(2：7，P ：r)混合液，于 90C恒温水浴中提取一定时 间[ 。空白对照为加入等量高氯酸与浓硝酸 混合液的无离子水。 (6)精确称取一定量烘至恒重的干材料 粉末，加入一定量 0．5 mol／L HCl，于 35℃恒 温水浴中提取一定时间 ，冷却后 ，5 000 g离 心 15 rain，上清液用于离子测定嘲。空白对照 为加入等量 0．5．,ot／L HCl的无离子水。 (7)叶片用无离子水冲洗 3次，迅速用吸 水纸吸干，然后精确称取一定量鲜材料，加入 收蕾 1994-05—05 1 山东省自拣科学基盘资助项日 适量无离子水仔细研磨后定容 ，于d c下 12 000 g离心 15 rain，上清液 用于 离子测 定 。空白对照为无离子水。 (8)叶片冲冼、吸干称重后放入一2O℃冷 冻 室中保存 一定时间．融化后按方法 (7)操 作[ 。 Na、K测定用 日立 z-8000原子吸收仪测 定 实验重复 3次 ，结果趋势一致 ，取一次实 验结果的数据。 结果与讨论 不同实验方法所得到的小麦叶片中 Na、 K含量不同(表 1)。从 Na来说 ，方法(1)灰化 2 h尚不能将Na完全提取出来，灰化 12 hNa 达最大值 ，超过 12 h Na不再增加。说明灰化 时 间延长并不使 № 减少。方法(4)和(5)与 方法(1)的结果相似，都是提取 12 h Na达最 大值，但并没有把 Na全部提取出来，而且方 法 (4)超过 24 h Na反而下降．说明方法(1) 提取时间过长将使 Na减少 。方法(3)提取时