2014届高三生物优化方案二轮复习课件 专题九第1讲 基因工程和细胞工程.pptVIP

第1讲　基因工程和细胞工程;考纲要求;限制酶;1．基因工程和克隆技术涉及哪些工具酶？ 基因工程的工具酶是限制酶和DNA连接酶，克隆技术的工具酶是纤维素酶、果胶酶和胰蛋白酶。;考点一　基因工程 图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是(　　);A．图甲中的质粒用BamH Ⅰ切割后，含有4个游离的磷酸基团 B．在构建重组质粒时，可用Pst Ⅰ和BamH Ⅰ切割质粒和外源DNA C．用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒 D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长;[自主尝试]　________ 【解析】图甲中的质粒用BamH Ⅰ切割后，会破坏两个磷酸二酯键，磷酸二酯键是由相邻脱氧核苷酸的磷酸基团和脱氧核糖脱水形成的，因此只含有2个游离的磷酸基团。由于BamH Ⅰ的切割位点在目的基因的内部，使用它切割外源DNA会破坏目的基因。用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ切割质粒后,虽然破坏了ampr基因，但是会保留下neo基因作为标记基因，以备筛选。用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ切割外源DNA后，可得到两个能与质粒连接的DNA片段，但是只有带目的基因的DNA片段与酶切后的质粒连接才符合要求。由于氨苄青霉素抗性基因遭到破坏，因此，只能用含新霉素的培养基进行筛选。 【答案】C;【链接提升】 1．限制酶切割时的注意事项;(1)注意切割的序列是否会连接成环：切割图1中的目的基因时，最好不要只用BamH Ⅰ，因为只用BamH Ⅰ切割时，目的基因的两端具有相同的黏性末端，易自行连接成环，因此最好同时用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ切割。 (2)限制酶的切割序列具有包含关系：图2中BamH Ⅰ和Mbo Ⅰ识别的碱基序列和酶切位点分别是G↓GATCC、↓GATC, 这两个限制酶都可切割同一碱基序列GGATCC。 (3)切割时注意是否破坏所有抗性基因,导致缺乏标记基因。;②构建过程：;(3)将目的基因导入受体细胞;(4)目的基因的检测与鉴定：;跟踪训练　某质粒上有Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。;(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于_________________。 (2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________，也不能____________________________。 (3)在构建重组质粒时，应选用________和________两种酶对________和_______________________进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。;(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。;培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有___________、_________________________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是________菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的___________作探针进行分子杂交检测，又要用____________________________________________________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 (5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______________技术，愈伤组织经__________________进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加_______________________________。;考点二　动物细胞培养和植物组织培养 (2013·高考大纲全国卷) 关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是(　　) A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C．烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒;[自主尝试]　________ 【解析】动物细胞培养的培养基中需加入动物血清，植物组织培养的培养基中需加入植物激素等，A项正确。动物细胞培养需利用胰蛋白酶将动物组织分散成单个细胞再进行培养,植物组织培养中不需要将细胞分离，B项错误。叶片细胞高度分化,