RNA干扰EP-CAM基因表达对胆囊癌细胞生物学行为的影响.pdfVIP

than that of NC group(107土9, P0.01) and blank control group(102±11，P0.01) ． Conciusions ： 1. Four miR RNAi expression vectors targerting EP-CAM were constructed successfully. 2. The recombinant plasmid pcDNA™6.2-GW/EmGFPmiR miRNA targeting human EP-CAM gene could effectively down-regulate EP-CAM expression, of which the pcDNA™6.2-GW/EmGFPmiR-EPCAM-1 was the best choice. 3. EP-CAM knockdown can effectively inhibit cellular proliferation and invasiveness in GBC-SD cells in vitro; And EP-CAM is a potential novel target for gallbladder cancer gene therapy. Key words ： gallbladder neoplasms ；epithelial cell adhesion molecule ； microRNA ；RNA interference ；cell proliferation ；cell apoptosis ；cell invasiveness ； cellular shape 5 前言 胆囊癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，占消化道癌肿的8.5%，其发病率居消 化道恶性肿瘤的第五位，近年来发病率还有逐年上升的趋势。女性多见，男女比 例为1:3左右，高发年龄约在50～60岁，并具有明显的人种和地域差异。胆囊癌 发病隐匿，早期缺乏特有的临床表现,容易发生局部浸润和远处转移，大部分胆 囊癌在行剖腹探查时已经发展到进展期，手术切除率低，预后差,欧美国家胆囊 癌术后5年生存率仅5%～13%，日本胆道外科学会调查治愈性切除5年生存率仅 26.4% 。传统的化疗和放疗又存在对肿瘤特异性和敏感性差，不良反应大，效果 [1] 不佳的缺点。目前胆囊癌的总体治疗效果尚不能令人满意 ，严重危害着人类健 康。 恶性肿瘤的发生、发展是环境因素与遗传因素相互作用的结果，是一个涉及 到多基因分子水平变化的多阶段过程，其中原癌基因的激活或（和）抑癌基因的 失活在恶性肿瘤的发生、发展过程中起关键作用。近年来分子生物学研究表明， 原发性胆囊癌亦为多基因、遗传、环境致癌因素等诱导下综合作用的结果。因此， 确定特异性高的分子标志物作为胆囊癌诊断、治疗的靶向分子及评估预后，有着 十分重要的意义。 上皮细胞黏附分子 （epithelial cell adhesion molecule , EP-CAM ）,是一种分 子量为40KD 的I型跨膜糖蛋白，是钙非依赖的同种细胞间的黏附分子。研究表明， [2] [3] EP-CAM在许多实体癌中高表达 ，与肿瘤的发生、发展及预后关系密切 。Meri Varga等研究发现EP-CAM在胆囊癌组织中高表达，与患者较差的生存预后相关， [4] 可作为胆囊癌独特的预后分子 。我们在前期的研究中亦发现EP-CAM在胆囊癌 中高表达，与患者较差的生存预后相关。因此，我们推测EP-CAM参与了胆囊癌 的进程，有希望成为胆囊癌基因治疗的靶点。 RNA干扰技术(RNA interference, RNAi) 是由短双链RNA诱导的同源mRNA 的降解过程，可使基因的表达受到抑制，它是在转录后水平抑制基因表达的一种 研究基因功能的有