HPLC法测定四君颗粒中的甘草酸含量_0.docVIP

HPLC法测定四君颗粒中的甘草酸含量 【摘要】 ［目的］用HPLC法测定四君粒颗中甘草酸的含量。［ 方法 ］HPLC用外标一点法，Kromasil ODS1 C18柱，甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（6733∶1）为流动相，流速为1.0ml/min，λ=250nm；［结果］甘草酸在0.1～1?g范围内呈良好线性，回归方程为Y=444185X-9336.9 r=0.9992，平均加样回收率99.7%、RSD%为1.0%（n=6）；［结论］方法简便、准确，专属性强，测定结果重复性好，为四君子粒颗中甘草的定量 分析 提供了 科学 有效的方法。 【关键词】 四君子粒颗；甘草酸；HPLC 　　Abstract：［Objective］To establish the method for detemining the content of Glycyrrhizinatic acid in Sijunzi Keli by HPLC.［Methods］Using Kromasil ODS1 C18 Column，methyol-0.2mol/L ammonium acetate-acetic acid glacial（6733∶1） as the mobile phase，detection wavelength as 250nm and flow rate was 1.0ml/min.［Results］ The Calibration Curve was linear at a range 0.1～1?g for the Glycyrrhizinatic acid and linear equation was Y=444185X-9336.9 r=0.9992.The average recovery was 99.7% and the related standard deviation(RSD) was 1.0%（n=6）.［Conclusion］This method was simple and accurate and proper， which could be provided for scientific quantitative analysis method of Radix et Rhizoma glycyrrhizae in Sijunzi Keli and the reduplication of the result was good. 　　Key words：Sijunzi Keli；Glycyrrhizinatic acid；HPLC 四君颗粒由党参、白术、茯苓和甘草四味中药组成，具有益气健脾的功能，是一古有成方，是组成各种处方的基础，没有含量测定，考虑到对照品来源的困难，甘草虽然不是君药，但在处方中起着极为重要的左使作用，加之对照品来源可靠易得，为此选择测定处方中甘草所含甘草酸的含量。 　　1 仪器与试药 日本岛津LC-10AT泵，SPD-10A紫外检测器；浙大N2010数据工作站。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其他有关试剂均为分析纯。对照品：甘草酸铵对照品（批号为110731-200407）购自 中国 药品生物制品检定所，作含量测定用。四君子颗粒浙江得恩德制药有限司（批号为050104、050105、050106）。市售药品：天津百慕药业有限公司，批号：0410003。 　　2 分析方法 　　2.1 色谱条件 　　（1）色谱柱：ODS C18柱(4.6×150mm，5μm)。（2）流动相：甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（6733∶1）。（3）检测波长：测定甘草酸的紫外吸收波长，证明他们在250nm有较大吸收，确定为250nm为检测波长，阴性对照无吸收峰。（4）流速：1.0ml/min；进样量：10μl。在此色谱条件下，对照品（图谱1）及经前处理后的供试品的甘草酸与其它组分基本达到分离（图谱3）。 　　2.2 对照品的制备 　　精密称取真空干燥（五氧化二磷）24h的甘草酸单铵盐对照品适量，精密称定，用流动相溶解并制成每1ml含50μg（己折合为甘草酸）的溶液，摇匀，即得(每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.2mg折合甘草酸为0.1959mg)。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　取本品粉末约5g，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相约45ml，超声处理（功率250W，频率20kHz）30min，取出，放冷，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 　　2.4 标准曲线 　　取“对照品的制备”项下的对照品溶液，分别进样2、5、10、15和20μl，按选定的色谱条件测定峰面积，以进样量（μl）为横坐标，峰面积为纵坐标，作图并进行线性回归， 计算 回归方程为Y=444185X-933