HPLCCDD法测定盐酸头孢吡肟及其制剂中的N甲基吡咯烷的含量论文.docVIP

　　HPLCCDD法测定盐酸头孢吡肟及其制剂中的N甲基吡咯烷的含量论文 闵翠娥 谭胜连 陆媛 张旭途 【摘要】 目的 建立高效液相电导法(HPLCCDD法)测定盐酸头孢吡肟中N甲基吡咯烷含量的方法。方法 以羧酸基键合硅胶为分析柱的填充剂metrosep C2(100mm×4.0mm，7μm)；流动相为0.01mol/L硝酸溶液∶乙腈(99∶1)；流速1ml/min；柱温35℃；进样量20μl；检测器：电导检测器。结果 N甲基吡咯烷在4.8～38.8μg/ml浓度范围与峰面积呈良好的线性关系，r=0.9999。高、中、低三种浓度的平均回收率为101.2%，RSD为1.3%。结论 该方法简便、准确、灵敏度高，重现性好，可作为盐酸头孢吡肟中的N甲基吡咯烷的含量测定方法。 【关键词】 HPLCCDD； N甲基吡咯烷； 注射用盐酸头孢吡肟 ABSTRACT Objective To develop an HPLC method for the determination Nmethylpyrrolidine in cefepime dihydrochloride. Method The chromatographic condition: the column etrosep C2 100mm×4.0mm, 7μm). The mobile phase consisted of acetonitrile∶0.01 mol/L nitric acid (1∶99),.freell/min, the column temperature l for Nmethylpyrrolidine, the average recovery ethod is accurate, simple, rapid, and ethylpyrrolidine in cefepime hydrochloride. KEY ethylpyrrolidine; Cefepime hydrochloride 头孢吡肟(cefepime)是第四代头孢菌素，具有独特的抗菌作用。盐酸头孢吡肟及其制剂中N甲基吡咯烷的测定一直是检验的难题。美、日药典收载HPLCCDD法［1，2］.freelm×4.0mm，7μm)；流动相为0.01mol/L硝酸溶液∶乙腈(99∶1)；流速1ml/min；柱温35℃；进样量20μl。取对照品溶液数次进样，其相对标准差(RSD)不得超过5.0%。 2.2 溶液配制 供试品溶液的制备 精密称取本品适量，加0.01mol/L硝酸溶液制成每1ml含相当于头孢吡肟约5mg的溶液，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备 精密称取N甲基吡咯烷对照品，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，精密量取此溶液5ml，加0.01mol/L硝酸溶液稀释成100ml，摇匀，作为对照品溶液。 2.3 空白溶剂、L精氨酸干扰性试验 精密称取L精氨酸适量，加0.01mol/L硝酸溶液制成10mg/ml的溶液，按上述色谱条件进样，取空白溶剂和L精氨酸适量进样，记录色谱图，结果表明L精氨酸不干扰N甲基吡咯烷的测定(图1)。 2.4 与钠、钾、氨、三乙胺分离度试验 分别称取钠、钾、氨、三乙胺适量，分别加0.01mol/L硝酸溶液制成5、10、5和70μg/ml的溶液，再分别取上述溶液适量置同一容量瓶中，混匀。分别取上述钠、钾、氨、三乙胺溶液及其混合溶液，按上述色谱条件进样，记录色谱图，结果表明钠、钾、氨、三乙胺分离度符合规定，不干扰N甲基吡咯烷的测定。 2.5 精密度试验 取对照品溶液20μl，连续进样5次，RSD为0.58%。 2.6 线性关系 精密称取N甲基吡咯烷对照品约50mg置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密量取此溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0和8.0ml，分别置100ml量瓶中，加0.01mol/L硝酸溶解至刻度，摇匀，照N甲基吡咯烷含量测定方法测定，记录色谱图，以N甲基吡咯烷峰面积A为纵坐标，以N甲基吡咯烷的浓度C(mg/ml)为横坐标绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程为： A=12.7992+3777C r=0.9999 结果表明N甲基吡咯烷在4.7～37.7μg/ml浓度范围内与其峰面积有良好的线性关系。 2.7 最小定量限 在上述色谱条件下，按信噪比为10∶3，测得N甲基吡咯烷的最小定量限为0.486μg/ml。 2.8 加样回收实验 精密称取注射用盐酸头孢吡肟(批号060930)约100mg，共9份，分三组，分别加入0.5mg/ml对照品溶液0.4ml、0.5ml、0.6ml，用0.01mol/L硝酸溶液稀释至10ml，摇匀