一株碱性蛋白酶产生菌的分离与应用.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2010, Vol.26, No.12 一株碱性蛋白酶产生菌的分离与应用 刘向宇，郭华，罗林 （湖南农业大学食品科学技术学院，湖南长沙 410128） 摘要：从湖南耒阳哲桥镇茶籽油榨油坊内采集土壤样品，分离筛选出能耐受茶皂素并产生碱性洗涤用蛋白酶的菌株。通过对筛 选出的菌株进行初步形态鉴定、蛋白酶活力测定和污布去污效果比较，挑选出一株符合要求的菌株，命名为 SJP-5。该菌株为革兰氏 阳性产芽孢杆菌，无荚膜，能耐受茶皂素，产生碱性蛋白酶，其酶活力为 150 U/mL，将其添加到清洗剂中并测定去污能力，试验表 明：污布去污值Ri 达到 18，是平行菌株去污力的2 倍。 关键词：油茶皂素；碱性蛋白酶；芽孢杆菌 文章篇号：1673-9078(2010)12-1326-1329 Separation of a Alkali Protease-producing Strain and Its Application LIU Xiang-yu, GUO Hua, LUO Ling (College of Food Science and Technology, Hunan Agricultural University，Changsha, 410128) Abstract: A G+ strain of Bacillus, named SJP-5, was isolated from the soil around an oil mill in Zheqiao Town, Leiyang , Hunan Province. It showed alkaline protease-producing capability with its enzyme activity being of 150 U/mL. The decontamination ability of a detergent added with this strain showed that the Ri was of 18，which was 2 times higher than the detergents added with other strains. Key words: camellia saponin; alkaline protease; bacillus 采用双酶水解法提取茶籽油后的水相废液为粘稠 1.1.2 仪器与设备 的浆液，其中含有大量的粗蛋白、碳水化合物和一些 BMJ-400C 培养箱，SW-CJ-1FD 超净工作台，722 活性功能成分，如茶皂素其具有去污抑菌等功效。油 型分光光度计，SKY-1102C 摇床，WSB-L 白度仪， 茶籽中的大分子糖类，在油脂提取过程中被糖化酶水 SG-400 均质机,LXJ- ⅡB 离心机。 解为还原糖类，若不及时处理，极易滋生微生物，尤 1.1.3 主要试剂 以产酸细菌和霉菌为甚，直接排放将会造成环境污染。 蛋白胨，酵母膏，琼脂粉，酪蛋白琼脂，福林酚 本文尝试通过微生物发酵的办法，即：筛选出适 试剂。 合在上述工艺废水中生长，并且能够分泌蛋白酶的高 1.1.4 培养基 效菌株，采用液态发酵的方法，尽量让菌体利用工艺 分离培养基：琼脂 20 g，茶粕浸出液 1000 mL， 水中的营养物质并产生碱性蛋白酶类，然后在温和的 调节pH 8.0 ，121 ℃高压蒸汽灭菌30 min。 条件下制成生物洗涤剂，把它们应用于污物洗涤上。 筛选培养基：营养