鹅催乳素受体基因3＇-末端序列克隆.pdfVIP

608 江苏农业学报(Jiangsu．，．ofA Sci．)，2007，23(6)：608～611 鹅催乳素受体基因3 ．末端序列克隆 邢光东 ， 王根林 ， 刘庆华 ， 傅泽红 ， 刘铁铮 (1．江苏省农业科学院畜牧研究所，江苏 南京 210014；2．南京农业大学动物科技学院，江苏 南京 210095) 摘要：通过比对鸡、火鸡、鸽、猪、大鼠5种动物及人催乳素受体(PRI R)，并根据它们的基因cDNA保守区设 计兼并引物，先扩增了鹅催乳素受体基因(gPRLR)eDNA一段606 bp保守区序列，再以此设计基因特异性引物，利 用3 一RACE技术克隆了gPRLR cDNA 3 一末端序列。序列分析表明，获得的g LR cDNA 3 一末端长1 876 bp，含编 码区后1 656 bp的编码核苷酸、终止密码子TAA和220 bp的3 UTR。参照鸡催乳素受体基因(cPRLR)，此gPRLR cDNA 3，_末端序列可分成6个外显子，其长度分别为148 bp、170 bp、145 bp、100 bp、70 bp和1 243 bp，与cPRLR cDNA最后6个外显子高度同源，终止密码子位于最后1个外显子的1 021 bp处。编码区后1 653 bp编码的551个 氨基酸gPRLR C-末端与鸡PRLR同源部分的同源性达到87．7％。 关键词：鹅；催乳素受体基因；3 一末端序列；RACE 中图分类号：$835．2 文献标识码： A 文章编号：2007)06~608-04 Cloning of 3 -end of Prolactin Receptor Gene in Goose XING Guang．dong’， WANG Gen．1in ，LIU Qing—hua ，FU Ze—hong ， LIU Tie—zheng (1．Institute ofAnimal Science，JiangsuAcademyofAgricultural Sciences，Nanjing 210014，China；2．CollegeofAnimal Science and Technology，Nanjing Agricultural University，Na ng 210095，China) Abstract： To characterize the prolactin receptor gene family of goose，a cDNA fragment of goose prolactin receptor gene(gPRLR)with a lenOh of606 bp was first isolated by RT—PCR using a pair of degenerate primers which were designed based on conservative regions among six species incluing of human，chicken，turkey，pigeon，pig and rat．The 3 一end of gPRLR eDNA was identified by 3 一RACE strategy using gene—specific primers complementaU to the isolated cDNA frag— ment．Sequence analysis of the 1 876 bp RACE product showed a 1 656 bp 3 coding region，a stop codon(TAA)and a 220 bp 3 UTR．Six predicted exons with sizes of 148 bp，170 bp，145 bp，100 bp，70 bp and 1 243 bp，respectively， which were found in the sequelmes were highly homologous to the last exons of cPRLR cDNA．The C—terminus of gear with 55 1 amino acids long encoded by the last 1 6