广金钱草组培快繁培养基配方的研究.pdfVIP

安徽农学通报，Anhui A ．Sei．Bul1．2007，13(24) 59 广金钱草组培快繁培养基配方的研究 杨洪元 覃吉胜 (1广西职业技术学院，广西南宁 530226；2桂林亦元生现代生物技术有限公司，广西桂林 541004) 摘 要：取带腋芽的广金钱草茎段作外植体，进行组织培养快繁培养基配方的研究。实验结果得出，广金钱草的初代 培养基为：MS+6一BA1．5+NAA0．1；继代培养基为：MS+6一BA1．5+NAA0．18；采用MS+6一BA0．6+NAA0．08+ IBA0．05培养基可诱导广金钱草愈伤组织分化出芽，其增殖倍数达到3—4以上。 关键词：广金钱草；组培快繁；愈伤组织；增殖；诱导分化 中图分类号 $339．4 文献标识码 B 文章编号 1007～7731(2007 J24—59一O2 前 言 带有一个茎节的1—2cm茎段．，在无菌条件下接种到初 广金钱草为豆科山蚂蟥属多年生半灌木状草本植物， 代培养基上进行培养。培养温度24—25℃，光强100— 又名落地金钱，铜钱草，假花生等，是一味常用的中草药， 200OLx，光周期12h。诱导芽和愈伤组织的大量形成。初 其味甘、性凉，具有清热、利尿、排石的功效，主要用于泌 代培养实验研究以MS为基础培养基，设计7个不同浓度 尿系统感染，泌尿系统结石症，急性黄疸型肝炎等疾病的 的6一BA、NAA研究其对广金钱草初代培养物形成的影 治疗。广金钱草既可以不带根的全草人药，还可以作为 响。 主要原料生产中成药如“消石饮”，“消石片”，和“广金钱 1．3 继代培养基配方试验 将初代诱导出来的愈伤组织 草冲剂”等。近年来由于过度的采伐利用，广金钱草野生 团粒打碎，均匀接种到继代增殖培养基上，培养温度24— 资源枯竭，目前广金钱草虽然可以采用种子或扦插进行人 26℃，光照强度800—100OLx，光周期12h。继代培养基实 工繁殖栽培，但繁殖率低且苗势退化现象严重，应用植物 验以最适初代培养基为基础，设计不同浓度的NAA和6一 组织培养快繁技术繁育广金钱草，无疑是一条较好的解决 BA人研究其对广金钱草增殖的影响。 1．4 诱导愈伤组织分化成苗试验 通过器官发生重新形 途径。本实验取带腋芽的广金钱草茎段作外植体，进行组 织快繁培养基配方研究，给广金钱草组培工厂化育苗提供 成新的芽称不定芽，先取形状整齐，结构紧密，并带有少量 芽眼的愈伤组织接种于诱导分化培养基中，培养温度24 一 定的技术帮助。 — 25℃ ，光照强度800—1000 h光周期 12h。设计不同 1 材料和方法 浓度的6一BA、NAA及IBA U研究其对诱导分化愈伤组 采用一年生经过无菌盆栽驯化幼嫩广金钱草茎段(种 织不定芽形成影响。依据经验，愈伤组织分化形成后，调 源采自广西百色右江矿务局长岭分局果园)进行以下4种 节激素用量，可诱导愈伤组织分化成苗，实现广金钱草快 试验： 速繁殖的目的，实验设计总的原则是在原用激素用量的基 1．1 外檀体处理方法试验 取幼嫩带茎节的广金钱 础上，逐步降低各激素用量，直至找出最佳诱导分化率的 草茎段，经自来水冲洗，再用洗衣粉液，轻轻刷洗广金钱草