病理常规制片技术各环节注意事项.pdfVIP

v01．26 2o08 No．1 病理常规制片技术各环节注意事项 刘力华，黄明辉，刘万胜 (永州职业技术学院医学院，湖南 永州 425006) 关键词：病理常规制片技术；环节；注意事项 另外，固定的时间应适当，小标本如肠黏膜等24小时即可，大 中图分类号：C,424．31 文献标识码：B 标本固定时间一般不少于24小时，但也不能过久，以免影响抗 文奄编号：1671—1246(2008】01—0107-02 原性。 3固定液的配制 病理常规制片技术是临床医学最常用、最基础的病理诊断 固定液分单纯固定液(如甲醛、乙醇)和混合固定液(如中 技术。切片质量是指导医生作出准确诊断和治疗的重要保证。 性甲醛液、AF液)。(1)甲醛。无色、可溶于水、易挥发、具有强烈 切片质量的好坏取决于取材、固定、固定液的配制、脱水及透 的刺激性气味，是常用的固定剂。浓度过高的甲醛会降低对组 明、浸蜡和包埋、组织切片、展片和烤片、HE染色、封片等环节。 织的穿透性，造成周围固定好、中央固定不到的现象；若浓度过 l取材 低，则达不到固定目的。故常用于固定的浓度为10％福尔马林 取材的好坏直接影响切片质量。首先，应注意所取组织的 (即1体积甲醛加9体积水配制而成)，实际含甲醛4％。固定后 方向及薄厚。在切取纤维、肌肉、胃肠道组织时应注意其走向， 的组织块应水洗10-20分钟，可使HE染色鲜艳。(2)乙醇。无 尽可能按与纤维走向平行方向取材为佳。切取的组织厚薄要均 色、可溶于水，可作为固定剂，也可用作脱水剂，一般浓度为 匀，一般以0．2～0．3cm为宜。对较脆组织如肝脏、甲状腺、大块癌 80％～95％，对组织有硬化作用，渗透力较弱，核蛋白被沉淀后仍 组织等，可适当切厚一点；而致密或试剂不易渗透的组织，如脂 能溶于水，导致核的着色不良，不宜作为固定液使用。(3)中性 肪组织、肺组织、纤维性肿瘤等，可切薄一些。其次，在切除淋巴 甲醛液。由浓甲醛(37％～40％)120ml，加蒸馏水880ml、硫酸二 结时应修掉两侧球冠，并尽量剔除周围的脂肪组织；若碰到不 氢钠4g、磷酸氢二钠13g配置而成。由于HE染色最佳着色的 可避免的钙化组织，应进行脱钙处理。最后，还应避免取材刀来 pH值为3．5～4．5，故中性甲醛液固定后易使细胞核发灰，核染色 回拖拉而影响取材质量。 质不佳。通常在没有特殊处理的情况下，常规HE可用12％～ 2固定 15％酸性甲醛液(即每100ml甲醛液内加5ml冰醋酸)，它对绝 病理标本离体后，由于环境变化可能发生自溶或腐败，导 大多数抗原来说有更好的保存作用，为首选固定液。(4)AF液。 致结构破坏，及时固定可使病理标本尽量保持其离体前的状 由95％乙醇90ml加浓甲醛10ml；也可由95％乙醇85ml、浓甲 态，故标本离体后应尽快固定，对体积较大的标本必要时可剖 醛 10ml和冰醋酸5ml配制。AF液有固定兼脱水的功能，固定 开固定。固定液与标本的体积比不得小于5：1，有特殊要求时应 后可直接放入95％乙醇中脱水。 首先选定相应固定液，如欲查糖原，应选择无水乙醇做固定液。 为防止固定液在组织中发生沉淀或结晶而影响观察及后 养学生尊重客观事实的科学作风。 实验题目分为锻炼操作能力题目：万用表测二极管、三极 讨论：播放多媒体课件或教师现场演示实验操作过程，得出