端粒酶活性检测在良恶性腹水鉴别诊断中的价值.pdfVIP

· 454 · JournalofQiqiharUniversityofMedicine，2012，Vo1．33，No．4 端粒酶活性检测在 良恶性腹水鉴别诊断中的价值 薛亚晶 张金业 朱 自立 陈 建 【摘要】 目的 本实验拟在 良恶性腹水行端粒酶活性检测，探讨端粒酶活性检测在 良恶性腹水鉴 别诊 断 中的价值。方法 收集良恶性腹水标本 ，分别对 良恶性腹水的端粒酶活性、CEA、CA19—9进行 检测 。结果 5O例恶性腹水端粒酶活性 阳性检 出率76 ，显著高于 35例 良性腹水端粒酶活性 阳性检 出率 8．57 ；恶性腹水的端粒酶活性的阳性率明显高于腹水 CEA、CA19—9的阳性率 ；在 良性腹水组 ， 端粒酶活性的阳性率与腹水 CEA、CA19—9的阳性率无明显差异。结论 端粒酶活性检测可以作为 良 恶性腹水鉴别的有价值的手段 。 【关键词】 端粒酶活性检测 腹水 诊 断 端粒酶是一种特殊 的DNA聚合酶 ，由RNA和相关蛋 白 表 1 良恶性腹水端粒酶活性与 CEA、CA19—9阳性例数对比 组成 ，含有引物特异识别位点，它能够 以自身携带的RNA为 模板 ，逆转录合成端粒 DNA并添加于染色体末端 ，从而维持 了端粒的稳定甚至使其永生化。在正常体细胞中，端粒酶活 性受限制 ，但在癌细胞和永生化细胞系 中它将被再激活 。本 3 讨论 实验拟在 良恶性腹水行端粒酶活性检测 ，探讨端粒酶活性检 端粒酶是一种特殊 的DNA 聚合酶 ，由RNA 和相关蛋 白 测在 良恶性腹水鉴别诊断中的价值。 组成 ，含有引物特异识别位点，它能够 以自身携带的RNA为 1 资料与方法 模板 ，逆转录合成端粒 DNA并添加于染色体末端 ，从而维持 1．1 一般 资料 共收集腹水标本 85例 ，其 中恶性腹水 5O 了端粒的稳定甚至使其永生化 。在正常体细胞 中，端粒酶活 例 ，良性腹水 35例 。恶性腹水 中肝癌 25例 ，胃癌 8例 ，大肠 性受 限制 ，但在癌细胞和永生化细胞系 中它将被再激活 。正 癌 8例 ，卵巢癌 5例 ，胰腺癌 2例 ，腹膜癌 1例 ，胆管癌 1例 。 常细胞 的分裂次数是有限的，端粒酶的激活是细胞走 向永生 良性腹水中肝硬化腹水 31例，结核性腹膜炎4例。 化 的必要途径 ，而永上化又被认为是肿瘤恶化 的必要步骤 。 1．2 方 法 肿瘤细胞 的端粒长恨短，其继续缩短将导致染色体融合、细 1．2．1 标本 的制作保存 取腹水标本 100ml，血性标本需要 胞死亡 ，而端粒酶的激活可 以维持端粒的长度 ，从而维持肿瘤 加入红细胞裂解液反复裂解 3次 ，所有标本加入 PBS洗涤 ， 的继续分裂 、增殖和生存_1]。端粒酶的激活 ，可能是肿瘤形 3000rpm离心 10min，弃上清 ，反复 2次 。加入预冷的细胞裂 成和发展 的共 同途径 。 目前 的研究表 明：端粒酶活性与肿瘤 解液 1O0“l，冰浴 30min。16000rpm离心 20min吸取上清 的发生密切 相关 ，人 类 9O 的肿瘤 组织存 在异 常端 粒 酶 活 置一7O℃保存备用。