基于显微拉曼检测蛋白核小球藻鉴别丁草胺及草甘膦 - chemical .pdf

Vol.36 高等 学校 化 学 学报 No.6 2015年6月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICALJOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES摇 摇 摇 摇 摇 摇 1082~1086 doi:10.7503/ cjc 摇 摇 基基于显微拉曼检测蛋白核小球藻 鉴别丁草胺及草甘膦 邵咏妮,蒋林军,潘摇 健,何摇 勇 (浙江大学生物系统工程与食品科学学院,杭州310058) 摘要摇 以蛋白核小球藻(Chlorellapyrenoidosa)作为鉴别载体,利用共聚焦显微拉曼光谱仪分别获取生长在除 草剂草甘膦、丁草胺污染水体以及正常水体的蛋白核小球藻茁鄄胡萝 卜素的拉曼光谱信息,对2种除草剂进 行了鉴别. 利用预处理后的光谱信号,建立偏最小二乘回归(PLS)预测模型及线性判别分析(LDA)分类模 型. 当阈值为依0郾3时,全波段建立的PLS模型对草甘膦和丁草胺的预测正确率高达83郾33%,特征峰建立的 LDA分类模型对2种除草剂的分类正确率均达到了100%. 结果表明,利用蛋白核小球藻为载体对丁草胺和 草甘膦2种除草剂进行鉴别是可行的,且LDA分类模型更适合除草剂的分类研究. 关键词摇 蛋白核小球藻;共聚焦显微拉曼光谱仪;偏最小二乘回归;线性判别分析;除草剂鉴别 中图分类号摇 O657摇 摇 摇 摇 文献标志码摇 A 除草剂对促进农业生产发挥着重要的作用. 但是在使用过程中,大部分除草剂未被利用就随雨水 及农田排水流入河流和湖泊. 虽然经过河流的稀释,除草剂的浓度很低,但同样对生态系统造成巨大 [1] 的损害 . 人饮用残留有药剂的水或者摄取残留有药剂的食物,药剂毒素积累到一定程度时也会对身 体造成伤害. 因此,检测水体除草剂污染对于维持良好的生态环境和保证人们的生命健康十分必 [2,3] 要 . 而鉴别除草剂种类,对于探明污染原因及提供水体污染的解决方案具有重要意义. 气相色谱法(GC) 可以对多种除草剂一次进样进行定性和定量分析;高效液相色谱法(HPLC)则 适用于不易气化或者受热易分解的除草剂的检测;而色谱鄄质谱联用(GC鄄MS)能够进行多种残留物进 行定性、定量分析[4~6]. 以上的检测鉴别方法准确、方便,但是对检测器的灵敏度要求高或者检测有 [7] [8] [9] 一定的局限性,并且样品前处理复杂. 生物传感器 、荧光光度法 和免疫分析法 等虽然操作简 单、方便,但是灵敏度及准确度都不高. 因此,需要开发简单、方便且准确的除草剂检测鉴别方法. 研究发现,与两栖类、鱼类、 甲壳类等水生生物相比,藻类对除草剂毒素更敏感,且对毒素响应阈 [10] [11] 值更高 ,是毒性分析的理想实验材料 . 藻类属于光能自养型生物,细胞代谢以光合作用为核心, 色素又是光合作用中重要的生物催化剂,除草剂毒素对藻类生长抑制的同时,也对色素积累产生影 响,通过色素在藻体的变化能够判定水中毒性物质的综合毒性,反映水中除草剂毒素信息. 蛋白核小 [12] 球藻对除草剂的反应比其它藻类更敏感 . [13] 拉曼信号是一种由入射光引起的分子的非弹性散射信号 . 拉曼光谱技术无需样品准备和制备 过程,简单,可重复且能够进行无损伤定性定量分析. 水的拉曼散射微弱,拉曼光谱也因此成为研究 [14] 水溶液中的生物样品和化学化合物的理想工具 . 微藻生物分子有特定的官能团,通过拉曼光谱可以 [15] 获得相应的特征峰 . 通过利用拉曼光谱技术研究微