植物组织培养快繁中存在的主要问题及防止措施.pdfVIP

SCmNCE＆ IECIINOLOGY F0RMAT10N 2008年 第3期 植物组织培养快繁中存在的主要问题及防止措施 巩 健 (淄博职业学院 山东 淄博 255013) 【摘 要】阐述了植物组织培养快繁中褐变、玻璃化、污染和移栽成活率低等问题出现的原因，提出预防和控制措施。 【关键词】组织培养；褐变；玻璃化；污染 Ia．m Problems and Counterplans in Plant Tissue Culture and Rapid Propagation Gong Jian (zibo Vocational Institute，Zibo，Shandong，255013) 【Abstract]In plant tissue culture and rapid propagation，there are many problems such as browning，vitfifiation，pollution and low survival rate of transplant．In this paper，the l~a$on of these ohenomenon is studied and some counterplans ale proposed 【Key words]plant tissue；browning；vitrifiation；pollution 植物组织培养技术自2O世纪初德国植物生理专家Habedandt提 培养基的状态、组成、生长调节物质及组合等要适宜。温度、PH值 出植物细胞全能性理论以来。至今已经发展成为现代生物技术的重要 要尽量调整到褐化物分泌最少的状态 (酸性环境不利于褐变的发生)； 组成部分，并且广泛应用于农业、林业、医药工业等方面，产生了巨大 大多数植物种类要求pH值在5．0—6 0。适当降低培养基的PH值可以 的经济效益和社会效益。虽然植物组织培养过程并不复杂，但在实验 降低多酚氧化酶的活性和底物利用率。从而抑制褐变。张妙霞等(1999) 和生产过程中常常会遇到一些问题。重者会导致试验和生产的失败。 Is]在进行柿树组织培养中发现，改良的MS培养基能促进外植体分化， 给科研和生产造成损失。本文针对组织培养过程中常出现的几个问题 减轻外植体的褐变程度。培养基中加入的生长调节物质不当，也会使 提出相应的防止措施。 外植体产生褐变。张卫芳等(2003)Es~对一年生薄壳核桃的茎尖培养中 1．褐变问题及防止措施 发现，随着培养基中6一BA浓度的升高，褐化率随之增高，褐化反应 褐变是组织培养中常遇到的问题，外植体在培养过程中，自身组 时间也提早；较低浓度的6一BA适宜茎尖的分化生长，褐化反应慢， 织从表面向培养基释放褐色物质。使培养基逐渐变成褐色，外植体也 部分培养基已无明显褐化现象；添加2，4一D、IAA的组合中，褐化反应 随之进一步褐变而死亡的现象。 稍有推迟[71。 1．1褐变的原理 培养过程中还要注意适宜的培养条件。因为在酚类物质的合成和 植物组织培养过程中的褐变现象是由多种因素综合产生的结果。 氧化过程中。有许多酶系统参与，其中部分酶系统是光活性的。由于较 随植物的种类、基因型、外植体生长部位以及生理状态、培养基及培养 强的光照和较高的温度。都可以提高PPO的活性从而会使酶促褐变 条件等的不同而不同。豆科植物和芸苔属植物在原生质体培养中容易 加强。所以建议在培养初期保持较低的温度(15—0~C)，黑暗或弱光下培 发生褐变是一个普遍性问题。在芸苔及其衍生种或变种中的褐化问题 养。均可减轻培养材料的褐变。 尤为严重。 1 2．4使用抑制剂和吸附剂 王永清等(1997)t 曾在樱花于不同培养基中生