X-连锁肾上腺脑白质营养不良的分子诊断方法研究.pdfVIP

生坐堕壁匡堂客壶!Q业生!Q且筮!!鲞整!殳拐些垫』坠丛生：坐!尘些!墅盟：∑生塑：型!：!垒 。临床实验诊断研究。 x一连锁肾上腺脑白质营养不良的分子诊断方法研究 柯龙风王志红黄梁浒严爱贞杨渤生兰风华 x．连锁肾上腺脑白质营养不良(x—linked汗，就诊于巾山大学附属第一医院，颅脑核磁共振检查示：双 adrenoJeukodystmpbv，x—AT．D)是过氧化物酶体病的一种，由侧枕顶颞叶脯白质内，胼胝体压部，双侧内囊后肢至大脑脚 ABcDl基因突变所致，该疾病基因定位于xq28，其成熟神经纤维走行区域异常改变沣}舍肾上腺脑白质营养不良的 700 mRNA长约3 bp，编码1个含745个氨基酸残基的蛋白诊断。 chaill 质，称为ABcDl蛋白。自ALD的致病基因被定位克隆以以卜所有患儿的血浆极长链饱和脂肪酸(verylong 来…，至今国际上已报告了900杂种ABcDl基因突变 h“y (wwwx-ald．n1)，其中错义突变占60％口J。笔者于2006年室检测)，其父母体健，否认近亲婚配史。 7月至11月分别对6个x—ALD家系进行基囡突变分析，现 (二)力L法 报告如下。 B100dMinj RNA 一、对象与方法 QIAGEN公司的QT^amp l(it说明提取先证 (一)临床资料 患儿l，男，9岁，以“视力、听力F降、走路小稳”为主 诉，就诊于北京大学第一医院，颅脑核磁共振检矗示：双侧侧 Ⅲ、nⅣ)进哥亍2次PcR卜“，其中每个片段的37端和下一片 脑室后脚可见大片状异常信号，符合肾上腺脑白质营养不良 的珍断。 含：长链RT—PcR产物1山、引物各30pmol、dN仰O．2 n瑚∥L、Taq 患儿2，男，6岁，以“反应迟钝、视力、智力下降3个月” DNA聚合酶5u。P-I按下列条件扩增：94℃ 为主诉，就诊于上海瑞金医院，颅脑核磁共振显示：双侧侧脑 预变性4mi“；94℃60s，56℃60s，72℃60s，30个循环；72℃ 事后脚可见大片状异常信号，考虑肾上腙脑自质营养不良。 其哥哥，6岁时出现视力、智力下降等症状，未经治疗，1年后 死亡。 物，委托上海生工公司进行DNA序列测定。 患儿3，男，8岁，以“视力F降、走路不稳、学习成绩下 M P一Ⅲ 降”为主酥，就诊于多家医院，3次颅脑核磁共振检查示：双 “譬—二．．二一·咖r2 ： 侧颡、顶针可见片状TI、’r2信号．符合肾上腺脑自质营养 P-ⅡP日 十 扣R}2 畸十 扫FIo P一Ⅱ P一Ⅳ 不良的核磁共振表现。 患儿4，男，12岁，以“反应迟钝、智力下降6个月”为主 诉就诊于福建医科大学附属第一医院，颅脑核磁共振检查 NF目 ● 扫RT-4 示：双侧脑睾后角旁脑白质内可见大片状长Tl、长他异常 P-FL 信号灶，胼胝体压部及脑干内异常信号灶，考虑肾上腺脑白 注：空心方框为ALDcDNA编码区；实心方框为PcR产物(P—I， 质营养不良。 P一Ⅱ，P一Ⅲ，P一Ⅳ，P—FL)；空心箭头为PcR引物位置；引物名标