莱芜职业技术学院任务引入知识引领方案制定方案修订任务实施检查 .ppt

莱芜职业技术学院 《生物制品生产技术》课程单元设计 莱芜职业技术学院 郑福山 项目 无细胞百日咳疫苗的生产 单元 1 2 3 4 5 任务 百日咳疫苗三级种子批的建立 百日咳杆菌的模拟发酵 百日咳疫苗原液的制备 百日咳疫苗半成品的制备 百日咳疫苗成品的制备 能具备时间观念，能够在规定时间内完成工作任务 能具备提出问题、分析问题并解决问题的能力 能养成认真观察、思考的习惯及动手能力 能熟练完成盐析和透析工作 能熟练使用和维护高速冷冻离心机等设备 了解百日咳毒素（PT）和丝状血凝素（FHA）的理化性质 掌握盐析的原理与方法 掌握透析的原理与方法 知识 目标 素质 目标 能力 目标 教学目标 某生物制品企业需要生产一批无细胞百日咳疫苗以应对该疾病的爆发。现需要根据《中国药典》（2005版）第三部的要求进行该产品的生产，检测后出厂投入使用。 上两次任务我们已经完成了百日咳杆菌的发酵生产，根据操作规程，下一步需要进行什么操作？有哪些注意事项？ 任务 引入 知识 引领 方案 制定 方案 修订 任务 实施 检查 评价 归纳 总结 作业 任务 引入 知识 引领 方案 制定 方案 修订 任务 实施 检查 评价 归纳 总结 作业 下面让我们共同来学习物质粗提和精提的常用方法和操作规程。 根据刚才所学内容制定百日咳疫苗原液制备的工作计划。 每组由教师决定一名学生到讲台前展示并汇报其工作计划。 任务 引入 知识 引领 方案 制定 方案 修订 任务 实施 检查 评价 归纳 总结 作业 各组都汇报完后，教师同学生进行分析，评价，肯定合理的、正确的方案内容，对普遍存在的问题讲解 每组汇报完后，其他组成员提出质疑，组内成员解答疑问 任务 引入 知识 引领 方案 制定 方案 修订 任务 实施 检查 评价 归纳 总结 作业 任务 引入 知识 引领 方案 制定 方案 修订 任务 实施 检查 评价 归纳 总结 作业 师生共同讨论制定百日咳疫苗原液制备的工作计划： 粗提组： 一次盐析： 全培养物+30.2%（W/V）硫酸铵 ↓ 4℃静置3-7天 离心、8000rpm×30分，收沉淀 一次浸提： ↓ 沉淀物+1/10培养物体积的1MNaCl、 0.05MPB， PH8.0， 1/万硫柳汞的缓冲液浸出七天 ↓ 4℃隔日搅拌24小时 离心、11000rpm×30分，收上清 任务 引入 知识 引领 方案 制定 方案 修订 任务 实施 检查 评价 归纳 总结 作业 二次盐析： 全培养物+20.2%（W/V）硫酸铵 ↓ 4℃静置3-7天 离心、11000rpm×30分，收沉淀 ↓ 二次浸提： 沉淀物+1/200—1/300培养物体积的1MNaCl、0.05MPB， PH8.0， 1/万硫柳汞的缓冲液浸出七天 ↓ 4℃搅拌3天 任务 引入 知识 引领 方案 制定 方案 修订 任务 实施 检查 评价 归纳 总结 作业 透析： 对1MNaCl、0.05MPB，PH8.0， 1/万硫柳汞的透析液 4℃透析，直到无NH4+存在 离心： ↓ 18000rpm×5h或30000rpm×3h，收上清 精提组： 去内毒素： ↓ 蔗糖密度梯度离心30000rpm×18-20h， 收集蔗糖浓度＜12%的抗原 任务 引入 知识 引领 方案 制定 方案 修订 任务 实施 检查 评价 归纳 总结 作业 抗原解毒： ↓ 抗原加戊二醛至0.05%作用4小时， 再加赖氨酸至0.2%作用2小时 ↓ 透析4℃ ↓ 超声处理二次，每次5分钟 任务 引入 知识