环氧合酶2介导四氢大麻酚抑制CA1区长时程抑制的作用.doc

　　环氧合酶2介导四氢大麻酚抑制CA1区长时程抑制的作用 【摘要】 目的 探讨环氧合酶2(cyclooxgense2, COX2)在四氢大麻酚(Δ9tetrahydrocannabinol, Δ9THC)抑制CA1区长时程抑制(longterm depression, LTD)中的作用。方法 在小鼠腹腔注射Δ9THC(10mg/kg)或COX2的选择性抑制剂NS398(10mg/kg)24h后切片，在海马CA1区记录场电位EPSP(fEPSP)，观察NS398和Δ9THC在LTD中的作用，并结合全细胞膜片钳技术观察THC对神经元膜兴奋性的影响。结果 ①给予低频电刺激(1Hz，15min)诱导CA1区LTD，Δ9THC可显著降低LTD。②Δ9THC并不改变海马CA1区基本的突触传递和膜的基本电学特性(包括膜电位、输入阻抗及放电特性)。③Δ9THC显著降低LTD的效应可被COX2的选择性抑制剂NS398所反转。④在COX2基因敲除的小鼠，Δ9THC降低LTD的作用被显著抑制。结论 在CA1区COX2介导了Δ9THC降低LTD的作用。 【关键词】 环氧合酶2；四氢大麻酚；长时程抑制; 突触传递；海马 　　ABSTRACT: Objective To explore the role of cyclooxgense2 (COX2) in tetrahydrocannabinol (THC)induced inhibition of longterm depression (LTD) in CA1 area in vitro. Methods The hippocampal slices g/kg) or COX2 inhibitor NS398 (10mg/kg). Field excitatory postsynaptic potentials (fEPSP) radiatum of the CA1 area in vitro to observe the effect of NS398, a selective inhibitor of COX2, on the THCinduced inhibition of LTD and THCs effect on membrane excitability in pyramidal neurons by using the p technique. Results ① Loulation (1Hz, 15min) inducedLTD in CA1 area ission and membrane excitability (including membrane resting potentials, input resistance and firing property). ③ THCinduced inhibition of LTD paired in COX2 knockout mice. Conclusion THCinduced inhibition of LTD in CA1 area ediated via COX2. 　　KEY g2+的切片用液(mmol/L)：2.5 KCl, 7.0 MgCl2，28.0 NaHCO3，1.25 NaH2PO4，0.5 CaCl2，7.0葡萄糖，3.0丙酮酸，1.0抗坏血酸和234蔗糖。脑片被切成350μm厚的薄片，将其转移到被氧饱和的人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid, ACSF)中进行孵育，ACSF的组成为(mmol/L)：125.0 NaCl，2.5 KCl，1.0 MgCl2，25.0 NaHCO3，1.25 NaH2PO4，2.0 CaCl2，25.0葡萄糖，3.0丙酮酸和1.0抗坏血酸，在36℃孵育0.5～1h，然后置于室温(22～24℃)至少1.5h后可进行电生理记录。记录时将脑片转移至记录槽，并在32～34℃持续被950mL/L O2、50mL/L CO2混合气饱和的ACSF灌流(灌流速度约为2mL/min)。在配有×60的入水镜头和微分干涉相差显微镜的直立显微镜(Olympus BX51SO，然后用复合溶剂(由Tg/mL的应用液(Hoffman ,et al. 2003; 2007)。NS398溶解于DMSO。 　　1.3 电生理记录 　　刺激Schaffer侧枝纤维，刺激频率0.05Hz。在Axoclamp2B膜片钳放大器的桥式整流模式(bridge mode)下，在CA1区放射层记录场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential, fEPSP